本术式的要点
羊膜移植是利用人羊膜进行的眼表重建术 。
羊膜具有抗炎、抗纤维化、抗血管新生和促进创面愈合的作用,是一种抗原性低的优良生物辅助材料。
手术方式大致分为三种:移植法(提供基质)、覆盖法(保护上皮)、填充法(填充组织)。
适应症包括复发性翼状胬肉 、化学烧伤 、Stevens-Johnson综合征 、持续性上皮缺损 、角膜 穿孔等。
在日本,2014年被纳入医保,必须由认证眼库 提供羊膜并由认证医生实施。
也有报道使用冷冻 保存羊膜或干燥羊膜门诊治疗重度干眼症 。
羊膜是孕妇子宫内包裹胎儿和胎盘的薄生物膜。它与绒毛膜和蜕膜共同构成胎膜。羊膜的基底膜是人体中最厚的,具有适当的弹性和伸展性,生物相容性优异。
羊膜移植(AMT)是将这种羊膜移植到眼表以重建角膜 和结膜 的手术方式。在眼科领域,1940年De Roth首次报道用于化学烧伤 导致的眼睑粘连。1995年,Tseng等人通过兔眼 实验证明了羊膜移植在眼表重建中的有效性,此后在国内外广泛普及。
在日本,经过临床研究和先进医疗制度,于2014年(平成26年)纳入医保。羊膜移植大致分为以下三种方法。
羊膜移植法 :旨在提供基质。
羊膜覆盖法(贴片法) :旨在覆盖上皮缺损 。
羊膜填充法 :旨在填充组织缺损 。
Q
羊膜不会引起排斥反应吗?
A
羊膜抗原性极低,是一种不会诱发排斥反应的优异生物辅助材料。无需HLA配型即可使用,具有与角膜移植 不同的优点。
羊膜移植的适应症多种多样。原则上,适用于其他治疗方法效果不佳的眼表疾病。
持续性角膜上皮缺损 :对于常规治疗无效的上皮缺损 ,采用羊膜覆盖法促进上皮化。
角膜 穿孔和角膜溃疡 :采用羊膜填塞法填充穿孔部位,作为角膜 实质的替代物。
角膜缘干细胞 缺乏症 :在无法获得结膜 移植物的双眼病例中,使用羊膜作为替代物。
对于严重的干性角结膜炎 ,短期(2-7天)放置冷冻 保存的羊膜正成为一种治疗选择1) 。已有报道显示角膜 染色评分、眼部不适感和严重程度显著改善。
羊膜由以下三层构成。
羊膜上皮 :单层上皮细胞层。
基底膜 :含有IV型和V型胶原蛋白。是角膜 和结膜 上皮的良好基质。
绒毛膜 :结缔组织层。是一种有滑腻感的组织,移植时根据需要去除。
羊膜对眼表重建有用的原因在于以下多方面的生物学作用。
作为基质的作用 :基底膜促进角膜 和结膜 上皮的伸展、增殖和分化。覆盖暴露的巩膜 ,并将结膜 切除边缘置于羊膜周边,可获得良好的上皮化。
抗炎作用 :抑制炎症细胞因子的产生。
抗纤维化作用 :抑制成纤维细胞增殖,减少术后瘢痕形成。
抗血管生成作用 :抑制新生血管 形成。
低抗原性 :HLA抗原表达极低,不诱发排斥反应。
这些特性使其在担心增殖性结膜 疾病复发或术后瘢痕的病例中发挥显著效果。丝裂霉素C同样抑制成纤维细胞,但羊膜还作为上皮的基质发挥作用,这一点更优。
Q
羊膜和丝裂霉素C如何区分使用?
A
两者都具有抑制成纤维细胞增殖的作用。在翼状胬肉 手术中,对于年轻、厚实、血管丰富的初发病例或复发病例,积极联合使用术中丝裂霉素C涂抹和羊膜移植。羊膜还具有作为上皮基质的功能优势,两者互补作用。
羊膜移植前后的眼前段照片
Panigrahi S, Swain P, Nanda A, et al. Tenon’s patch graft to the rescue during COVID-19 pandemic. G
MS Ophthalmol Cases. 2023 Mar 1;13:Doc10. Figure 1. PM
CI D: PMC10073980. License: CC BY.
A:术前伴有即将穿孔的Mooren溃疡;B:术后1天;C:术后1个月。羊膜移植后眼表面重新上皮化,从高穿孔风险状态向稳定化进展的过程可观察到。
移植法
目的 :提供新的基质。促进上皮正常伸展。
朝向 :羊膜上皮侧朝上(表面),绒毛膜侧朝下(基底)。
固定 :用8-0薇乔线或10-0尼龙线缝合。
特点 :宿主上皮在羊膜上伸展。移植后的羊膜不取出,保留在原位。
覆盖法
目的 :暂时保护脆弱的角结膜 上皮。促进消炎和上皮化。
朝向 :羊膜上皮侧朝向角膜 面(下)。与移植法方向相反。
固定 :用10-0尼龙线在角膜缘 周围连续缝合。
特点 :宿主上皮在羊膜下伸展。通常1~2周后取出羊膜。
填充法
目的 :填充角膜基质 缺损 (“填充物”)。
方法 :将多层羊膜重叠填充于缺损 处(多层羊膜移植)。
特点 :填充的羊膜被角膜基质 成纤维细胞替代。
以下为翼状胬肉 手术联合羊膜移植术 的基本步骤。
羊膜准备 :从储存容器中取出,用抗菌药物(氟氧头孢钠50mg/mL生理盐水)清洗后,浸泡于生理盐水中。确认正反面,去除多余的绒毛膜。
正反面确认(海绵技术) :将含生理盐水的海绵接触羊膜。绒毛膜侧,羊膜会粘附在海绵上并抬起;羊膜上皮侧则不会抬起。
羊膜放置与缝合 :将羊膜上皮面朝上置于巩膜 上,用10-0尼龙线缝合。注意进针时避免穿透巩膜 (深度约为巩膜 厚度的1/3)。
修剪 :修剪上下方的羊膜后,切除近角膜缘 部分。若在缝合处附近修剪,可能导致术后羊膜卷曲。
结膜 缝合 :用7-0可吸收缝线将结膜 缝合至羊膜和巩膜 上。
佩戴保护性软性角膜 接触镜 :用于缓解术后疼痛和促进上皮再生。
丝裂霉素C(0.04%,涂抹3分钟)在羊膜移植前,置于切除增殖组织后的巩膜 表面和结膜 下。取出后用200mL生理盐水充分冲洗。
使用抗菌药物和类固醇 滴眼液。类固醇 至少持续使用1个月以上,根据情况更换为低效价制剂。
通过荧光素染色 评估上皮进展程度。
角膜上皮缺损 消失后,取下保护性角膜 接触镜。
结膜 上皮在数周内会延伸到羊膜上。
如果担心复发,可长期使用曲尼司特滴眼液。
手术注意事项
弄错羊膜的正反面会阻碍上皮伸展。术中务必使用海绵技术确认。
如果绒毛膜侧朝上,结膜 上皮可能难以伸展,有时需要再次手术。
在巩膜 上穿针时注意避免穿孔。以针尖隐约可见的深度为参考。
术后眼压 升高(类固醇 诱发)是最常见的并发症。定期测量眼压 很重要。
在日本,羊膜移植于2014年被纳入保险。角膜移植 根据《器官移植法》实施,而羊膜的处理不受该法直接监管,按照日本组织移植学会的指南进行管理。
实施时需要满足以下条件:
术者标准 :必须根据日本角膜 学会和日本角膜移植 学会制定的羊膜移植指南获得术者认证。
设施标准 :必须作为羊膜移植实施设施向管辖的地方厚生局备案。
羊膜供应 :必须使用日本组织移植学会认证的羊膜库提供的羊膜。
由日本组织移植学会认证的机构运营。Ⅰ类认证库可向其他机构供应,Ⅱ类库仅供应本机构。认证协调员负责向捐赠者说明、获取同意、羊膜处理与检查、保管等工作。
捐赠羊膜应满足的主要要求如下。
捐赠者为择期剖宫产的孕妇
预产期前3个月内传染病检查(HBV、HCV、HIV、HTLV-1、梅毒)阴性
产后60~90天窗口期后的复查阴性
采集时及冷冻 保存1个月后的微生物检查阴性
在-80℃以下冷冻 保存。保存期限为采集后2年内。
Q
是否任何机构都能进行羊膜移植?
A
羊膜移植仅在拥有认证医师的认证机构进行。医师需满足日本角膜 学会制定的标准并获得认证,机构也需向地方厚生局备案。
一种将冷冻 保存的羊膜安装在塑料环上的装置(PROKERA®)已被开发出来1) 。它可以像巩膜接触镜 一样佩戴在眼表面,无需缝合,因此可以在门诊进行。羊膜通常在3至5天内溶解。两项针对重度干眼的多中心回顾性研究报告称,佩戴后2至7天角膜 染色评分和眼部不适感显著改善1) 。
也有报道使用干燥、伽马射线灭菌的羊膜与绷带式隐形眼镜一起使用的方法1) 。一项对56只眼睛的回顾性研究显示,1至2周内角膜上皮糜烂 得到改善。还开发了中心开口的大直径(17毫米)干燥羊膜,旨在减轻佩戴期间的视力 下降。
冻干羊膜 :与传统的−80°C冷冻 保存相比,可在室温下保存的冻干羊膜的临床应用正在推进。储存和运输的便利性大大提高。
药物浸渍羊膜 :将抗真菌药物等浸渍到羊膜中进行移植的技术已有病例报告。
3D打印技术的应用 :针对急性Stevens-Johnson综合征 ,开发了使用3D打印环的快速羊膜固定方法,据报道可缩短手术时间。
羊膜提取物滴眼液 :含有从羊膜中提取的生长因子等的滴眼液研究正在进行中。
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Kirlew TJ. Amniotic membrane transplant. Cornea. 2006;25(3):368; author reply 368-9. PMID: 16633045.
McGhee CN, Patel DV. Mooren’s ulcer and amniotic membrane transplant: a simple surgical solution?. Clin Exp Ophthalmol. 2011;39(5):383-5. PMID: 21749593.
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