Thuốc nhuộm nhãn khoa

Các điểm chính trong nháy mắt

Thuốc nhuộm nhãn khoa là công cụ thiết yếu được sử dụng rộng rãi từ chẩn đoán ngoại trú đến hỗ trợ phẫu thuật.
Fluorescein không thể thiếu để phát hiện tổn thương biểu mô giác mạc và kết mạc, đánh giá màng nước mắt, đo nhãn áp và chụp mạch huỳnh quang.
Xanh lissamin vượt trội trong việc hiển thị tổn thương biểu mô kết mạc và đang trở nên phổ biến như một chất thay thế cho rose bengal.
Rose bengal vượt trội trong phát hiện sớm các bệnh bề mặt nhãn cầu, nhưng có tính kích ứng và độc tính ánh sáng mạnh, do đó sử dụng hàng ngày có xu hướng giảm.
Xanh trypan (bao trước), ICG (ILM), triamcinolone (dịch kính) và xanh brilliant G (ILM) được sử dụng để hình ảnh hóa mô trong phẫu thuật.
Khi sử dụng bộ lọc xanh không chứa, có thể quan sát rõ tổn thương biểu mô kết mạc ngay cả khi nhuộm fluorescein.
Trong chụp mạch huỳnh quang, hiếm khi xảy ra tác dụng phụ nghiêm trọng như sốc phản vệ.

1. Thuốc nhuộm nhãn khoa là gì?

Thuốc nhuộm nhãn khoa (dyes in ophthalmology) là các loại thuốc được sử dụng để hình ảnh hóa có chọn lọc các mô mắt hoặc màng nước mắt. Chúng được sử dụng trong mọi khía cạnh của thực hành nhãn khoa, từ chẩn đoán ngoại trú đến nhận dạng mô trong phòng mổ.

Có thể phân loại thành hai loại chính theo mục đích sử dụng:

Thuốc nhuộm chẩn đoán đoạn trước: Fluorescein, xanh lissamin và rose bengal là ba loại đại diện. Chúng cần thiết để phát hiện tổn thương biểu mô giác mạc và kết mạc, đánh giá màng nước mắt và chẩn đoán khô mắt.

Thuốc nhuộm đoạn sau và phẫu thuật: Xanh trypan, indocyanine green (ICG), triamcinolone acetonide và xanh brilliant G. Được sử dụng để nhuộm bao trước trong phẫu thuật đục thủy tinh thể, nhuộm màng giới hạn trong (ILM) trong phẫu thuật dịch kính và chụp mạch huỳnh quang (FFA/ICGA).

Mỗi chất nhuộm có đặc tính nhuộm, bước sóng huỳnh quang và ái lực mô riêng. Việc lựa chọn phù hợp theo mục đích là rất quan trọng.

2. Các loại và đặc tính của chất nhuộm chính

Fluorescein

Là chất nhuộm được sử dụng rộng rãi nhất trong lâm sàng. Một chất nhuộm hòa tan trong nước màu cam, dễ kiếm, an toàn và ít kích ứng.

Đặc tính huỳnh quang: Bước sóng hấp thụ tối đa khoảng 490 nm (ánh sáng xanh). Khi được kích thích, phát ra huỳnh quang vàng-xanh ở bước sóng 520-530 nm. Được quan sát dưới ánh sáng xanh từ bộ lọc xanh coban.

Nguyên lý nhuộm: Fluorescein không nhuộm tế bào mà nhuộm các khoảng gian bào bị phá vỡ. Biểu mô giác mạc bình thường với các liên kết chặt phát triển hầu như không bắt màu. Các vùng khuyết biểu mô hoặc tăng tính thấm nước sẽ bắt màu.

Dạng bào chế và nồng độ:

Dạng bào chế	Nồng độ	Công dụng chính
Que thử	0,6-1 mg	Nhuộm bề mặt mắt
Thuốc nhỏ mắt	0,5-2%	Nhuộm bề mặt mắt
Dung dịch tiêm	10-20%	Chụp mạch huỳnh quang đáy mắt

Ứng dụng lâm sàng chính:

Phát hiện tổn thương biểu mô giác mạc (loét, trợt, nhiễm trùng, bệnh biểu mô chấm nông)
Đo thời gian phá vỡ màng nước mắt (BUT)
Đánh giá hình lưỡi liềm nước mắt
Đo nhãn áp bằng áp kế Goldmann
Xét nghiệm Seidel (xác nhận rò rỉ thủy dịch trong chấn thương xuyên nhãn cầu)
Xét nghiệm biến mất màu Jones (kiểm tra sự thông suốt của ống lệ mũi)
Chụp mạch huỳnh quang (FFA)
Đánh giá sự phù hợp của kính áp tròng

Nồng độ dưới 3% không gây kích ứng mắt. Không độc khi sử dụng tại chỗ, là lựa chọn đầu tiên để khám phần trước mắt.

Lissamine xanh

Thuốc nhuộm thực phẩm tổng hợp có tính axit. Có ái lực nhuộm cao với tế bào chết, tế bào thoái hóa và sợi nhầy, khu trú ở nhân. Sự nhuộm màu tăng lên ở những vùng mà sự kết dính giữa các tế bào bị phá vỡ.

Đặc tính hấp thụ: Có đỉnh hấp thụ ở đầu đỏ của quang phổ khả kiến (630nm). Sử dụng bộ lọc đỏ tự do, bước sóng truyền qua bị hấp thụ và vùng nhuộm màu trông có màu đen.

Xuất sắc trong việc mô tả tổn thương biểu mô kết mạc, được ưa chuộng để nhuộm kết mạc nhãn cầu. Cũng hữu ích trong đánh giá bệnh lý biểu mô bờ mi (LWE) và quan sát đường Marx.

Ít gây kích ứng và ít độc tế bào hơn so với rose bengal. Trong những năm gần đây, nó ngày càng phổ biến như một chất thay thế cho rose bengal. Tuy nhiên, nồng độ trên 2% gây khó chịu. Không tương thích với kính áp tròng, do đó cần rửa bằng nước muối sinh lý sau khi sử dụng.

Rose Bengal

Dẫn xuất halogen của fluorescein. Nhuộm biểu mô giác mạc và kết mạc thiếu lớp phủ mucin và các tế bào thoái hóa. Nó được hấp thụ ở những khu vực thiếu sự bảo vệ của màng nước mắt trước nhãn cầu.

Được cho là vượt trội hơn các chất nhuộm khác trong phát hiện sớm các bệnh bề mặt nhãn cầu, và đã được sử dụng để đánh giá khô mắt, viêm kết mạc vành trên và herpes biểu mô. Có một số hoạt tính kháng virus đối với virus herpes simplex type 1, nhưng không nhằm mục đích điều trị nhãn khoa.

Tuy nhiên, nó có nhiều nhược điểm. Có độc tính ánh sáng, và ngay cả dung dịch 1% cũng gây đau nhói và cảm giác bỏng rát ngay sau khi nhỏ. Cần gây tê tại chỗ trước khi nhuộm. Thuốc nhuộm dễ lưu lại trên kết mạc và da quanh mắt, và mắt cần được rửa ngay sau khi khám. Sự hiện diện của nước mắt nhân tạo đã ngăn cản sự hấp thụ thuốc nhuộm.

Ở Nhật Bản, không có giấy thử thương mại, và sử dụng dung dịch tự pha 1%. Vì nhược điểm nhiều hơn ưu điểm, việc sử dụng hàng ngày đang giảm dần, và dần được thay thế bằng nhuộm lissamine green hoặc fluorescein với bộ lọc xanh tự do.

Fluorescein

Đối tượng: Tổn thương biểu mô giác mạc & màng nước mắt

Bước sóng huỳnh quang: Hấp thụ 490nm → Phát xạ 520-530nm

Ưu điểm: Đa năng và an toàn. Có thể sử dụng dễ dàng với giấy thử

Bộ lọc: Xanh coban + bộ lọc xanh tự do

Lissamine Green

Đối tượng: Tổn thương biểu mô kết mạc, LWE, đường Marx

Bước sóng hấp thụ: 630 nm

Ưu điểm: Tối ưu để nhuộm kết mạc. Ít kích ứng hơn rose bengal

Bộ lọc: Bộ lọc không đỏ

Rose Bengal

Đối tượng: Vùng thiếu hụt mucin và biểu mô biến đổi

Đặc điểm: Dẫn xuất halogen của fluorescein

Ưu điểm: Xuất sắc trong phát hiện sớm bệnh bề mặt nhãn cầu

Nhược điểm: Độc tính ánh sáng. Kích ứng mạnh, đang giảm sử dụng

Q Làm thế nào để phân biệt sử dụng fluorescein và lissamine green?

Fluorescein tối ưu để phát hiện tổn thương biểu mô giác mạc và đánh giá màng nước mắt. Lissamine green xuất sắc trong việc mô tả tổn thương biểu mô kết mạc, hữu ích trong đánh giá bệnh lý biểu mô mi mắt và đường Marx. Trong đánh giá chính xác khô mắt, cả hai có thể được sử dụng cùng nhau trong “nhuộm sinh học kép”, áp dụng một que fluorescein và hai que lissamine green đồng thời.

Thuốc nhuộm phẫu thuật

Trong phẫu thuật đoạn sau và đoạn trước, các thuốc nhuộm được sử dụng để hỗ trợ hình dung các mô khó nhìn thấy nhằm tạo điều kiện cho các thủ thuật phẫu thuật.

Trypan blue: Thuốc nhuộm được FDA chấp thuận để nhuộm bao trước (0,06%). Không thấm qua bao, do đó có thể hình dung bao trước tương phản với vỏ thủy tinh thể không nhuộm. Đặc biệt hữu ích ở mắt có phản xạ đỏ giảm hoặc dây chằng Zinn yếu. Không độc với nội mô giác mạc và an toàn trong phẫu thuật đục thủy tinh thể ở trẻ em. Cũng được sử dụng trong DSEK và DALK. Cần thận trọng vì có thể nhuộm màu vĩnh viễn IOL acrylic ưa nước.

Indocyanine green (ICG): Thể hiện ái lực cao với collagen loại IV và laminin, được sử dụng để nhuộm màng giới hạn trong (0,05-0,5%). Khi tiêm tĩnh mạch, 98% liên kết với protein huyết tương nên không khuếch tán ra ngoài mạch, được sử dụng trong chụp mạch huỳnh quang ICG để hình ảnh hóa mạch màng bồ đào. Độc tính võng mạc do phân hủy là một vấn đề, trầm trọng hơn khi tiếp xúc với ánh sáng. Sử dụng trong nội nhãn chưa được FDA chấp thuận. Infracanine green (IFCG) không chứa iốt được coi là một thay thế ít độc hơn.

Triamcinolone acetonide: Steroid tổng hợp không tan trong nước (40 mg/ml), liên kết dưới dạng tinh thể trắng với các mô không tế bào như dịch kính và màng giới hạn trong. Được sử dụng trong phẫu thuật cắt dịch kính để tạo điều kiện hình dung và bóc tách dịch kính sau. Cũng có thể được sử dụng để xác nhận các sợi dịch kính trong tiền phòng khi vỡ bao sau trong phẫu thuật đục thủy tinh thể. Không có báo cáo về độc tính võng mạc, nhưng có nguy cơ tiến triển đục thủy tinh thể và tăng nhãn áp.

Xanh Brilliant G: Thuốc nhuộm (0,025%) có ái lực chọn lọc với ILM, được FDA chấp thuận để nhuộm ILM. Không nhuộm ERM, cho phép “nhuộm âm tính” khi ERM nổi bật trên nền xanh của ILM khi có ERM. Cũng được sử dụng trong “nhuộm kép” bằng cách tiêm lại sau khi bóc ERM để nhuộm ILM. An toàn hơn so với ICG.

Xanh Trypan

Nồng độ: Bao trước 0,06%, Hậu phòng 0,15%

Đối tượng: Bao trước, Bao Tenon, ERM

FDA: Đã chấp thuận

Chú ý: Nhuộm vĩnh viễn IOL ưa nước

ICG

Nồng độ: Tiêm tĩnh mạch 40 mg/2 ml, ILM 0,05–0,5%

Đối tượng: ILM, Mạch mạch (ICGA)

FDA: Chưa được chấp thuận sử dụng trong mắt

Chú ý: Độc võng mạc do phân hủy

Xanh Brilliant G

Nồng độ: Nhuộm ILM 0,025%

Đối tượng: ILM (chọn lọc)

FDA: Đã chấp thuận

Đặc điểm: Nhuộm âm tính, nhuộm kép

Ngoài ra, Bromophenol Blue (0,13-0,2%, nhuộm ILM/ERM, chưa được FDA phê duyệt) và Patent Blue (0,25%, ái lực trung bình với ERM, thấp với ILM, chưa được FDA phê duyệt) đôi khi được sử dụng trong phẫu thuật dịch kính có nhuộm màu. Cả hai đều được cho là ít độc hơn ICG đối với võng mạc, nhưng dữ liệu còn hạn chế.

3. Ứng dụng lâm sàng và cách sử dụng thuốc nhuộm

Đánh giá tổn thương biểu mô giác mạc và kết mạc

Nhuộm fluorescein là phương pháp xét nghiệm cơ bản nhất trong đánh giá các bệnh lý đoạn trước.

Mẹo quy trình nhuộm: Trong nhuộm fluorescein như một xét nghiệm nước mắt, điều quan trọng là không làm thay đổi thể tích nước mắt càng nhiều càng tốt. Nhỏ 1-2 giọt nước muối sinh lý lên giấy thử fluorescein, lắc đều để loại bỏ nước thừa. Thực hiện nhuộm bằng cách chạm nhẹ giấy thử vào rìa của màng nước mắt dưới. Tránh chạm trực tiếp vào nhãn cầu. Giữ giấy thử thẳng đứng có thể giảm thiểu lượng giọt nhỏ. Không nên dùng thuốc tê nhỏ mắt vì có thể gây tổn thương biểu mô nhỏ.

Quan sát ngay sau khi nhuộm: Các vùng khuyết biểu mô hoặc bong tróc lớp biểu mô bề mặt sẽ bắt màu. Trong loét giác mạc, ranh giới vết loét trở nên rõ ràng, hữu ích để đánh giá mức độ bệnh và đáp ứng điều trị. Trong nhiễm trùng giác mạc, tổn thương dạng cành cây của herpes simplex và tổn thương giả cành cây của acanthamoeba có thể được quan sát rõ ràng.

Nhuộm muộn: Hiện tượng xảy ra sau 1 phút hoặc lâu hơn sau khi nhuộm. Ngay cả khi không có khuyết biểu mô, nếu các điểm nối chặt bị suy yếu do độc tính của thuốc, fluorescein sẽ khuếch tán vào trong biểu mô và bắt màu. Các vùng kết dính kém trong xói mòn giác mạc tái phát, vùng xâm lấn biểu mô kết mạc vào giác mạc và vùng rối loạn chức năng hàng rào trong bệnh lý giác mạc do thuốc có thể được phát hiện.

Quan sát tổn thương biểu mô kết mạc: Ở kết mạc, nền trắng làm giảm độ tương phản của fluorescein. Vấn đề này có thể được giải quyết bằng cách sử dụng bộ lọc xanh lam (bộ lọc truyền ánh sáng có bước sóng 520-530 nm trở lên). Với bộ lọc xanh lam, tổn thương biểu mô kết mạc có thể được phát hiện tương đương hoặc tốt hơn so với nhuộm rose bengal, loại bỏ nhu cầu sử dụng rose bengal.

Tính điểm: Trong chẩn đoán và đánh giá mức độ khô mắt, dựa trên tiêu chuẩn chẩn đoán khô mắt năm 2006, mức độ nhuộm được đánh giá ở ba góc phần tư (kết mạc thái dương, giác mạc, kết mạc mũi) theo thang điểm 0-3, và tổng điểm từ 3 trở lên trên 9 được coi là bất thường. Trên thang điểm NEI (Viện Mắt Quốc gia), đánh giá được thực hiện trên 5 vùng giác mạc với điểm 0-15.

Đánh giá lớp nước mắt

Thời gian phá vỡ màng nước mắt (BUT): Nhuộm fluorescein, đo thời gian (giây) từ khi mở mắt đến khi màng nước mắt bị phá vỡ. Giá trị ≤5 giây được coi là bất thường. Yêu cầu bệnh nhân nhắm mắt nhẹ nhàng rồi mở nhanh, đo 3 lần và lấy trung bình. Tránh nhắm mắt mạnh vì sẽ ép tuyến meibom và làm thay đổi lớp dầu.

Kiểu phá vỡ màng nước mắt: Gần đây, khái niệm TFOD (chẩn đoán định hướng màng nước mắt) đang trở nên phổ biến. Kiểu phá vỡ màng nước mắt khi đo BUT được phân loại thành 6 dạng, được sử dụng để chẩn đoán phân nhóm khô mắt và lựa chọn điều trị (TFOT).

Kiểu	Đặc điểm	Tình trạng bệnh lý gợi ý
area break	Phá vỡ dạng mảng rộng	Thiếu nước mắt
line break	Đường thẳng đứng ở giác mạc dưới	Giảm thể tích nước mắt
spot break	Phá vỡ dạng chấm	Bất thường bề mặt giác mạc

Area break cho thấy giảm thể tích nước mắt nghiêm trọng, cần đặt nút điểm lệ. Line break phản ánh màng nước mắt mỏng đi, còn spot break phản ánh bất thường về khả năng thấm ướt bề mặt giác mạc.

Đo Nhãn Áp Bằng Phương Pháp Áp Lực

Trong máy đo nhãn áp Goldmann, nhuộm fluorescein là bắt buộc. Khi đưa bộ lọc xanh lam vào và chạm lăng kính áp lực vào giác mạc, sẽ quan sát thấy hai nửa vòng tròn fluorescein ở trên và dưới. Điều chỉnh trống sao cho mép trong của hai nửa vòng tròn chạm nhau để đọc nhãn áp. Chiều rộng thích hợp của nửa vòng tròn là khoảng 1/10 đường kính 3,06 mm (khoảng 0,2 mm). Nhuộm quá mức làm chiều rộng tăng và nhãn áp đo được cao hơn; nhuộm không đủ làm nhãn áp đo được thấp hơn.

Chụp Mạch Huỳnh Quang Đáy Mắt

Chụp mạch huỳnh quang fluorescein (FFA): Tiêm tĩnh mạch fluorescein 10% hoặc 20%. Khoảng 70% fluorescein liên kết với protein huyết tương, phần còn lại ở dạng tự do. Sử dụng bộ lọc kích thích xanh coban để kích thích fluorescein trong võng mạc và hắc mạc, ánh sáng xanh phản xạ bị hấp thụ bởi bộ lọc chắn vàng-xanh để chỉ chụp huỳnh quang. Được sử dụng để đánh giá nhiều bệnh như bệnh võng mạc tiểu đường, tắc tĩnh mạch võng mạc, thoái hóa điểm vàng do tuổi già và thiếu máu cục bộ điểm vàng. Ở bệnh nhân suy giảm chức năng thận, giảm liều xuống một nửa hoặc ít hơn.

Chụp mạch huỳnh quang ICG (ICGA): ICG liên kết 98% với protein huyết tương nên khó khuếch tán ra ngoài mạch máu. Vì được kích thích bằng ánh sáng hồng ngoại (cận hồng ngoại), có thể thu được hình ảnh rõ nét hơn FFA ngay cả ở mắt có độ mờ môi trường. Ưu việt trong hình ảnh mạch máu hắc mạc, được sử dụng để đánh giá bệnh mạch máu hắc mạc dạng polyp (PCV), tân mạch hắc mạc và viêm màng bồ đào sau. ICG được bài tiết qua gan vào mật, do đó có thể thực hiện ngay cả ở bệnh nhân lọc máu.

4. Lưu Ý Khi Sử Dụng và Tác Dụng Phụ

Lưu Ý Khi Nhuộm Phần Trước Mắt

Thứ tự nhuộm: Vì bản thân nhuộm rose bengal có thể làm trầm trọng thêm tổn thương biểu mô giác mạc và kết mạc, hãy luôn nhuộm fluorescein trước, quan sát kỹ, sau đó mới chuyển sang nhuộm rose bengal.

Fluorescein: Khi sử dụng tại chỗ, nồng độ dưới 3% an toàn, không gây kích ứng hay độc hại cho mắt. Tuy nhiên, tránh sử dụng khi đang đeo kính áp tròng mềm vì chúng bị nhuộm màu.

Xanh lục Lissamine: Không tương thích với kính áp tròng, do đó sau khi sử dụng cần rửa mắt bằng nước muối sinh lý.

Rose Bengal: Có độc tính với ánh sáng và vết nhuộm dễ tồn tại, do đó cần rửa mắt ngay sau khi khám. Gây tê nhỏ mắt đầy đủ trước khi nhuộm.

Tác Dụng Phụ Của Chụp Mạch Huỳnh Quang Đáy Mắt

Trong chụp mạch huỳnh quang đáy mắt (FFA), vì fluorescein được tiêm tĩnh mạch, có thể xảy ra các tác dụng phụ toàn thân.

Sau khi xét nghiệm, nước tiểu có màu vàng tươi, và da vàng kéo dài 2-3 giờ. Giải thích trước rằng nước tiểu có màu kéo dài đến ngày hôm sau. Hiếm khi, fluorescein thấm vào da toàn thân gây vàng da giả (pseudojaundice) ²⁾. Trong y văn, tổng cộng 11 trường hợp tử vong liên quan đến fluorescein đã được báo cáo ²⁾. Các cơ chế tác dụng phụ được đề xuất bao gồm phản xạ thần kinh phế vị, dị ứng thuốc, giải phóng histamine, phóng thích giao cảm hành não liên quan đến lo âu, và tác dụng độc co thắt mạch trực tiếp ²⁾.

Q Các tác dụng phụ của chụp mạch huỳnh quang (FFA) là gì?

Tác dụng phụ nhẹ bao gồm buồn nôn, nôn, mề đay và ngứa, xảy ra ở khoảng 10% trường hợp. Tác dụng nghiêm trọng bao gồm sốc phản vệ (khoảng 1/10.000 người), và đã có báo cáo tử vong. Sau xét nghiệm, da vàng và nước tiểu có màu là tạm thời và vô hại. Hiếm khi, vàng da giả với da toàn thân phát huỳnh quang đã được báo cáo. Bệnh nhân có cơ địa dị ứng cần đặc biệt thận trọng.

Lưu ý về thuốc nhuộm phẫu thuật

Xanh trypan: Nếu không rửa sạch nhanh, sẽ nhuộm dịch kính trước và bao sau. Thường biến mất trong 1-2 tuần. Có nguy cơ nhuộm vĩnh viễn IOL acrylic ưa nước, và FDA không khuyến cáo.

ICG: Cần lọc để loại bỏ các hạt không tan. Tiếp xúc với ánh sáng làm tăng độc tính võng mạc. Có thể xuyên qua lỗ hoàng điểm và làm tổn thương biểu mô sắc tố võng mạc. Đã có báo cáo lắng đọng vĩnh viễn trên đĩa thị giác. Tiêm vào đoạn sau của mắt chứa đầy dịch để giảm thiểu tiếp xúc với hoàng điểm.

Triamcinolone: Tồn tại trong dịch kính tới 40 ngày. Có nguy cơ tiến triển đục thủy tinh thể và tăng nhãn áp. Đã có báo cáo viêm nội nhãn, mủ tiền phòng và mủ tiền phòng giả.

5. Nguyên lý nhuộm và đặc tính huỳnh quang

Cơ chế huỳnh quang của fluorescein

Huỳnh quang là hiện tượng phân tử hấp thụ ánh sáng bước sóng thấp và phát ra ánh sáng bước sóng cao hơn. Fluorescein hấp thụ ánh sáng xanh lam ở khoảng 490 nm và phát ra huỳnh quang vàng lục ở 520-530 nm.

Trên lâm sàng, kích thích được thực hiện bằng ánh sáng xanh lam qua bộ lọc xanh coban. Tuy nhiên, bước sóng truyền qua tối đa của bộ lọc xanh coban là 390-410 nm, không khớp với bước sóng hấp thụ tối đa của fluorescein (490 nm), do đó kích thích không tối ưu ¹⁾. Khi lắp bộ lọc không xanh (truyền qua trên 520-530 nm) vào hệ thống quan sát, ánh sáng xanh phản xạ bị cắt và độ tương phản huỳnh quang được cải thiện.

Nguyên lý nhuộm của từng thuốc nhuộm

Fluorescein: Hệ số phân bố dầu/nước là 0,5-0,6, về nguyên tắc có thể đi qua màng tế bào ở một mức độ nhất định. Tuy nhiên, các tế bào bề mặt của biểu mô giác mạc bình thường có các điểm nối chặt phát triển tốt nên không đi qua giữa các tế bào. Ngoài ra, chúng được bao phủ bởi mucin, do đó giác mạc bình thường hầu như không bắt màu. Ở các khuyết tật biểu mô, nó bám vào màng đáy và phát huỳnh quang, và ở những vùng chức năng hàng rào bị suy giảm, nó thấm dần theo thời gian dưới dạng nhuộm chậm.

Biểu mô kết mạc có chức năng hàng rào yếu hơn biểu mô giác mạc, và theo thời gian, fluorescein thấm qua và nhuộm toàn bộ. Do đó, cần ghi nhận kết quả ngay sau khi nhuộm. Sự khác biệt về tính thấm này có thể được sử dụng để phân biệt biểu mô giác mạc và biểu mô kết mạc (vẽ đường Marx, xác định phạm vi xâm lấn của biểu mô kết mạc).

Rose Bengal và Xanh Lissamine: Cả hai đều nhuộm biểu mô giác mạc-kết mạc thiếu lớp phủ mucin và các tế bào thoái hóa. Khả năng nhuộm của rose bengal và xanh lissamine gần như tương đương, nhưng trên lâm sàng, xanh lissamine ít gây kích ứng hơn và phù hợp hơn để phát hiện các rối loạn biểu mô kết mạc.

ICG: Thể hiện ái lực cao với collagen loại IV và laminin. Các chất này hiện diện với nồng độ cao ở màng giới hạn trong (ILM) của võng mạc, do đó ILM bắt màu chọn lọc. Khi tiêm tĩnh mạch, 98% liên kết với protein huyết tương và không khuếch tán ra ngoài mạch máu, đó là nguyên lý của ICGA. Tuy nhiên, sự phân hủy gây ra quá trình oxy hóa tự cảm ứng, dẫn đến độc tính võng mạc.

Xanh Brilliant G: Được hấp thu chọn lọc bởi ILM nhưng không bởi màng biểu mô (ERM). Tính chất này có thể được sử dụng để nhuộm âm tính (làm nổi bật ERM trên nền xanh của ILM).

6. Nghiên cứu mới nhất và triển vọng tương lai

Fluorescein Corneography (FCG)

Đánh giá nhuộm fluorescein thông thường bằng đèn khe có những thách thức như giới hạn về đặc tính kích thích của bộ lọc xanh coban, giới hạn độ sâu trường ảnh do độ cong giác mạc, ảnh hưởng của màu mống mắt và sự phụ thuộc vào người quan sát ¹⁾.

Soifer và cộng sự đã phát triển “Fluorescein Corneography (FCG)” bằng cách chuyển đổi chế độ chụp mạch huỳnh quang (FA) của máy chụp cắt lớp quang học (OCT, Heidelberg Spectralis II) để chụp ảnh giác mạc ¹⁾. Spectralis II sử dụng laser 490 nm để kích thích tối ưu và bộ lọc chắn ở khoảng 525 nm để chụp huỳnh quang một cách chọn lọc ¹⁾. Với thấu kính 55°, toàn bộ giác mạc (từ rìa đến rìa) có thể được lấy nét trong một hình ảnh duy nhất ¹⁾.

Trong một nghiên cứu trên 50 bệnh nhân khô mắt và 10 người khỏe mạnh, FCG cho thấy sự thống nhất giữa các đánh giá viên cao hơn so với hình ảnh đèn khe. Hệ số tương quan nội lớp (ICC) cho điểm nhuộm giác mạc theo thang NEI là 0,96 đối với FCG và 0,86 đối với đèn khe (p<0,001) ¹⁾.

Ở bệnh nhân có mống mắt sáng màu, điểm số hình ảnh đèn khe thấp hơn đáng kể so với FCG (6,11 so với 8,94; p=0,026), nhưng ở mống mắt tối màu không có sự khác biệt (8,16 so với 8,25; p=0,961)¹⁾. Trên đèn khe, phản xạ ánh sáng xanh bị nhầm lẫn với mống mắt sáng và cản trở phát hiện PEE, trong khi FCG không phụ thuộc vào màu mống mắt¹⁾.

Vì FCG sử dụng các thiết bị OCT-FA phổ biến rộng rãi, nó có tiềm năng chuẩn hóa, số hóa và tự động hóa việc nhuộm giác mạc trong cả nghiên cứu lâm sàng và thực hành hàng ngày¹⁾.

Q Fluorescein Corneography (FCG) khác gì so với phương pháp quan sát truyền thống?

FCG là một kỹ thuật mới sử dụng chế độ chụp mạch huỳnh quang của thiết bị OCT để chụp ảnh giác mạc. Với laser 490 nm để kích thích fluorescein tối ưu và bộ lọc chắn để loại bỏ ánh sáng phản xạ, nó có thể phát hiện tổn thương biểu mô giác mạc với độ nhạy và độ tương phản cao hơn so với đèn khe. Ưu điểm lớn là không bị ảnh hưởng bởi màu mống mắt và có độ đồng thuận giữa các người đánh giá cao (ICC 0,96 so với 0,86).

7. Tài liệu tham khảo

Soifer M, Azar NS, Blanco R, et al. Fluorescein CorneoGraphy (FCG): Use of a Repurposed Fluorescein Imaging Technique to Objectively Standardize Corneal Staining. Ocul Surf. 2023;27:77-79.
Bertani R, Ferrarez CE, Perret CM, et al. The Fluorescent Patient: An Unusual Effect of Fluorescein Angiography. Cureus. 2021;13(5):e15011.
Wolffsohn JS, Arita R, Chalmers R, Djalilian A, Dogru M, Dumbleton K, et al. TFOS DEWS II Diagnostic Methodology report. Ocul Surf. 2017;15(3):539-574. PMID: 28736342.