醋酸纖維素膜
孔徑0.22μm的微孔濾膜：被認為是最佳的標準選擇。
形狀：切成5mm的細條（一端方形，一端錐形）。在表面做記號以便定向。
用於PCR（聚合酶鏈反應）：使用直徑10mm的圓形濾膜。
印痕細胞學
一目了然的要點
Section titled “一目了然的要點”1. 什麼是印痕細胞學？
Section titled “1. 什麼是印痕細胞學？”印痕細胞學是一種低侵入性檢查，將醋酸纖維素濾紙貼附於眼表，收集表層上皮細胞，進行組織學、免疫組織化學和分子生物學分析。
1977年，Egbert等人為研究結膜杯細胞建立了該技術，後經Tseng改良，使其在眼表疾病的臨床應用中得以推廣。
病理診斷大致分為組織學和細胞學。細胞學因無法提供組織結構資訊而被視為組織學的輔助檢查，但在眼部，由於組織學檢查創傷較大，細胞學檢查具有很高的實用性。
Q
印痕細胞學與常規結膜抹片（刮取細胞學）有何不同？
A
印痕細胞學使用濾紙剝離上皮，以二維片狀收集細胞。結膜抹片則用棉棒或細胞學刮匙刮取收集。印痕細胞學在評估杯細胞的分佈和密度方面更優。
2. 主要發現與臨床意義
Section titled “2. 主要發現與臨床意義”由於印痕細胞學是一種檢查方法，而非針對「症狀」的疾病，本節描述在採集標本中觀察到的所見及其臨床意義。
- 正常結膜上皮細胞：扁平，核明顯，核/質比低。
- 輪部上皮細胞：較小且排列緊密，核/質比高。
- 正常結膜杯狀細胞：分佈於整個結膜，從上皮基底層向表面增大。集中存在於鼻下側象限。
- 杯狀細胞減少：在眼類天皰瘡、史蒂文斯-強森症候群、重度化學外傷、乾眼中發生上皮化生，杯狀細胞數量減少。
- 角化上皮細胞出現：在上輪部角結膜炎、眼類天皰瘡、史蒂文斯-強森症候群中角化進展。
- 角膜上出現杯狀細胞：角膜輪部幹細胞缺乏症中發生結膜化，原本不存在的杯狀細胞出現在角膜表面。
- 多形性色素上皮細胞：提示眼表面鱗狀上皮腫瘤的所見1)。
- 發炎細胞：活動性發炎的指標。
3. 適應症與風險因素
Section titled “3. 適應症與風險因素”印痕細胞學適用於以下廣泛的疾病和病症。
眼表疾病
- 乾性角結膜炎/乾眼症候群
- 異位性角結膜炎/過敏性鼻結膜炎
- 維生素A缺乏症
- 角膜輪部幹細胞缺乏症
- 眼類天皰瘡/史蒂芬斯-強森症候群
- 上輪部角結膜炎
- 黏多醣症
- 治療性角膜切除術（PTK）後評估
- 棘阿米巴角膜炎
- 病毒/披衣菌感染
- 囊狀纖維化
- 濾過泡評估/隱形眼鏡配戴評估
腫瘤
- 眼表面鱗狀上皮腫瘤
- 結膜鱗狀化生
- 結膜黑變病
與眼表鱗狀上皮腫瘤相關的風險因素
Section titled “與眼表鱗狀上皮腫瘤相關的風險因素”眼表鱗狀上皮腫瘤分為結膜上皮內瘤變（CIN）和浸潤性鱗狀細胞癌。主要風險因素如下。
- UV-B光：最大的風險因子。好發於角膜緣，擴散至角膜表面和球結膜。
- 人類乳突病毒16型和18型：已顯示人類乳突病毒的參與。
- 免疫缺陷：HIV/AIDS患者中眼表鱗狀上皮腫瘤的發生率較高。
- 遺傳易感性：著色性乾皮病中鱗狀細胞癌的發病率高。
4. 檢查技術與方法
Section titled “4. 檢查技術與方法”- 使用0.5%丙美卡因等點眼麻醉（也可在無麻醉下進行）。
- 放置開瞼器，乾燥採集部位。
- 擦去多餘的淚液和藥物，以提高濾紙的粘附效率。
濾紙的種類和形狀
Section titled “濾紙的種類和形狀”比較濾紙的類型。
硝酸纖維素膜
梯形條狀（約3×6mm）：標準形狀。
需要區分正反面：光滑面為正面。將反面（粗糙面）貼附於結膜上皮。
免疫組織化學：硝酸纖維素膜適用。
Biopore膜
用於角膜緣幹細胞缺乏症的診斷：與醋酸纖維素、硝酸纖維素一樣是可選方案。
共同特性：可採集1~3層表面上皮細胞。
- 用玻璃棒或Goldmann壓平眼壓計頭，將濾膜輕輕壓在眼表面5~10秒。
- 保持眼瞼不接觸濾紙。
- 注意：被淚液浸濕後採集效率會降低。
- 通常採集1~3層眼表面上皮細胞。
- 透過牢固黏附，可以採集數層複層化的細胞片。
常規染色方法
Section titled “常規染色方法”- 過碘酸雪夫（PAS）反應：10%福馬林固定後進行。杯細胞染成紅紫色。角結膜上皮基底膜、杯細胞、後彈力層、水晶體囊等也被染色。
- 蘇木精-伊紅染色：95%乙醇固定後，蘇木精+伊紅處理30秒→丁醇脫水→丁醇+二甲苯透明→二甲苯過夜。
- 巴氏染色：廣泛用作細胞學的常規染色方法。
- 吉姆薩染色：用於感染評估。革蘭染色在懷疑細菌或真菌時選擇。
特殊染色與技術
Section titled “特殊染色與技術”- 電鏡用：1%戊二醛+釕紅+4%磷酸緩衝甲醛固定→鋨酸後固定→脫水→樹脂包埋。
- 免疫組織化學用：用硝酸纖維素膜採集→噴霧固定→轉印到多聚賴氨酸包被玻片上→丙酮1小時溶解膜→37°C 2小時消化纖維素→進行免疫細胞化學染色。注意：二甲苯會破壞細胞表面抗原，故不使用。
檢查後注意事項
Section titled “檢查後注意事項”採集部位會出現上皮缺損，回家後可能引起眼痛。事先向患者說明，並開立角膜保護劑眼藥水。
5. 臨床應用與判定
Section titled “5. 臨床應用與判定”眼表面疾病的評估
Section titled “眼表面疾病的評估”各疾病的印痕細胞學所見如下所示。
角膜輪部幹細胞耗竭症的診斷
Section titled “角膜輪部幹細胞耗竭症的診斷”在角膜輪部幹細胞耗竭症的診斷中，有觀點認為印痕細胞學是黃金標準（但臨床上並未廣泛使用）。
角膜上出現杯細胞是結膜化的直接證據，可作為診斷依據。將濾紙應用於角膜中央部，確認杯細胞的有無。
各腫瘤診斷中印痕細胞學的預測準確度如下所示。
| 疾病 | 診斷預測準確度 |
|---|---|
| 眼表面鱗狀上皮腫瘤（組織學診斷） | 80% |
| 中度異型增生 | 77% |
| 棘阿米巴角膜炎 | 94.6% |
眼表鱗狀上皮腫瘤確診的黃金標準是切除切片檢查。印痕細胞學和脫落細胞學難以區分表層和浸潤性病變，因此不用於確診。
在慢性春季角結膜炎背景下發生的眼表鱗狀上皮腫瘤，與假上皮瘤樣增生難以鑑別。如果印痕細胞學檢測到多形性色素上皮細胞，可能是懷疑眼表鱗狀上皮腫瘤的線索1)。
Q
印痕細胞學能否確診眼表鱗狀上皮腫瘤？
A
組織學診斷預測準確率為80%，確診需要切除切片檢查。由於印痕細胞學難以區分浸潤性病變和上皮內病變，因此被視為輔助診斷工具。
6. 病理生理學（檢查原理）
Section titled “6. 病理生理學（檢查原理）”醋酸纖維素濾膜通過將眼表上皮的最表層（1-3層）連同黏液分泌物一起剝離並採集。
當濾膜牢固黏附時，可以採集數層複層細胞片，從而二維評估細胞的形態、分佈和密度。
在正常結膜上，杯狀細胞分佈於整個結膜。慢性發炎和重度乾眼會破壞杯狀細胞，導致上皮化生（鱗狀化生）。角膜緣幹細胞缺乏症中，緣部幹細胞耗竭導致角膜上皮補充功能喪失，結膜上皮覆蓋角膜表面，形成「結膜化」。印痕細胞學在角膜上發現杯狀細胞是這種結膜化的證據。
7. 最新研究與未來展望（研究階段報告）
Section titled “7. 最新研究與未來展望（研究階段報告）”與非侵入性診斷方式的比較
Section titled “與非侵入性診斷方式的比較”印痕細胞學雖然是低侵入性，但會在採集部位造成上皮缺損，因此並非完全非侵入性的檢查。近年來，以下新的檢查方式正在發展。
各診斷方式的特性如下所示。
| 檢查方式 | 特性 | 備註 |
|---|---|---|
| 印痕細胞學 | 可評估杯狀細胞和免疫組織化學 | 僅評估1~3層；存在上皮缺損 |
| 活體共軛焦顯微鏡 | 以1~10 μm解析度進行細胞定量 | 需要患者配合5~15分鐘 |
| 高解析度光學同調斷層掃描 | 區分浸潤性與上皮內病變 | 上皮厚度>120 μm提示浸潤 |
活體共軛焦顯微鏡能夠以110微米的解析度觀察體內角膜和結膜細胞。它可以進行細胞定量，但需要患者配合515分鐘。
高解析度光學同調斷層掃描（高解析度前眼部OCT）透過識別上皮增厚（超過120微米），被認為有助於區分浸潤性和上皮內病變。
關於眼表鱗狀上皮腫瘤藥物治療的研究
Section titled “關於眼表鱗狀上皮腫瘤藥物治療的研究”對於眼表鱗狀上皮腫瘤，已研究多種藥物治療，包括絲裂黴素C 0.04%、5-氟尿嘧啶、干擾素α-2b、抗VEGF藥物和西多福韋，但尚未建立官方指引。
在一例以慢性春季角結膜炎為背景的24歲男性眼表鱗狀上皮腫瘤中，印跡細胞學檢測到多形性色素上皮細胞，經過兩個週期的絲裂黴素C 0.04%治療後確認腫瘤縮小。隨後切除活檢（包括4毫米切緣、無接觸技術、冷凍療法和羊膜移植）病理顯示輕至中度異型增生，6個月追蹤期間未見復發1)。印跡細胞學也被認為可用於絲裂黴素C治療後的監測。
Q
是否有新的檢查方法可以替代印跡細胞學？
A
活體共軛焦顯微鏡和高解析度光學同調斷層掃描是正在發展的非侵入性檢查方式。高解析度OCT以上皮增厚（>120微米）為指標，被認為有助於區分浸潤性病變，但兩者仍包含研究階段成分。印跡細胞學在識別杯狀細胞和進行免疫組織化學染色方面仍具有獨特價值。
8. 參考文獻
Section titled “8. 參考文獻”- Ghosh Dastidar A, Khedia D, Goel S. Ocular surface squamous neoplasia masquerading as pseudoepitheliomatous hyperplasia in chronic vernal keratoconjunctivitis. GMS Ophthalmol Cases. 2024;14:Doc03.
- Tsatsos M, Delimitrou C, Tsinopoulos I, Ziakas N. Update in the Diagnosis and Management of Ocular Surface Squamous Neoplasia (OSSN). J Clin Med. 2025;14:1699.
- Siu GDY, Young AL, Cheng LL. Limbal stem cell deficiency: diagnosis and non-surgical management. Ann Eye Sci. 2023;8:13.