角膜内皮疾病
Fuchs角膜内皮营养不良（FECD）：研究最多的适应症。联合后弹力层剥离术（DSO），据报道可促进角膜透明、减少中央角膜厚度并改善视力1)。
大疱性角膜病变（PBK）：前房内注射培养的CEC加ROCK抑制剂，11例中有10例术后24周CEC密度达到≥1,000 cells/mm²4)。
虹膜角膜内皮综合征（ICE）：RKI对角膜内皮功能障碍的潜在效用已被提出2)。
Rho激酶抑制剂
一目了然的要点
Section titled “一目了然的要点”1. 什么是Rho激酶抑制剂？
Section titled “1. 什么是Rho激酶抑制剂？”Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，作用于小GTP酶RhoA的下游2)。已鉴定出两种亚型ROCK1和ROCK2，其激酶结构域具有92%的同源性2)。它们在角膜上皮、基质和内皮中均有表达，参与细胞骨架重组、细胞增殖、迁移、黏附和凋亡调节2)。
角膜内皮细胞（CEC）表达ROCK，ROCK抑制剂（RKI）可促进CEC的伤口愈合和再生3)4)。基于这一特性，RKI作为角膜内皮疾病的一种有前景的药理学方法受到关注1)。
临床使用的RKI有利帕舒地尔和奈他舒地尔。两者最初均作为青光眼治疗药物开发，但已证实其促进角膜内皮再生的作用，从而扩展了在角膜疾病中的应用1)2)。
| 药物 | 制剂/用法 | 批准地区 |
|---|---|---|
| 利帕舒地尔 | 0.4%滴眼液，每日两次 | 日本、中国 |
| 奈他舒地尔 | 0.02%滴眼液，每日一次 | 美国、欧洲 |
| Y-27632 | 研究用试剂 | 未获批 |
Y-27632是使用最广泛的研究用RKI，在培养CEC技术和临床前研究中发挥着重要作用3)。
Q
为什么治疗青光眼的药物对角膜疾病也有效？
A
ROCK抑制剂作为青光眼治疗药物，通过提高小梁网和施莱姆管的通透性来降低眼压。然而，角膜内皮细胞中也表达ROCK，抑制ROCK可促进CEC增殖、迁移和粘附，并抑制凋亡3)。通过角膜内皮再生这一不同机制，它们也被应用于角膜疾病。
2. 主要适应症和临床效果
Section titled “2. 主要适应症和临床效果”围手术期应用
ROCK抑制剂给药后观察到以下临床变化。
- 角膜透明：DSO联合利帕舒地尔组23例中22例获得角膜透明。与单独DSO组相比，透明达成更快，矫正视力（BCVA）显著改善，中央角膜厚度（CCT）显著减少1)
- 角膜内皮细胞形态变化：利帕舒地尔给药后观察到一过性细胞边界模糊和假性滴状角膜。这被认为是由于肌动球蛋白收缩减弱导致突起形成3)
- 副作用表现：结膜充血最常见。角膜涡状混浊是奈他舒地尔的特征性表现2)
Q
哪些患者预期对ROCK抑制剂有效？
A
ROCK抑制剂被认为在周边角膜仍保留健康内皮细胞储备的病例中最有效1)。对于早期至中度FECD与DSO联合使用，或在白内障手术时保护角膜内皮有用。在严重内皮细胞减少的病例中，角膜移植仍是根本性治疗1)。
3. 作用机制与药理学
Section titled “3. 作用机制与药理学”RhoA/ROCK信号通路
Section titled “RhoA/ROCK信号通路”当RhoA与GTP结合（活化型）时，与ROCK的Rho结合域结合，通过构象变化激活ROCK2)。活化的ROCK直接磷酸化肌球蛋白轻链（MLC），并通过磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基1（MYPT1）抑制肌球蛋白磷酸酶2)。这增强了细胞收缩性、应力纤维形成和黏着斑。
ROCK还激活LIM激酶，后者磷酸化并失活cofilin，抑制肌动蛋白丝解聚2)。
对角膜各层的作用
Section titled “对角膜各层的作用”- 角膜上皮：ROCK抑制降低肌动球蛋白张力，促进细胞伸展和迁移。加速伤口闭合2)
- 角膜基质：抑制TGF-β诱导的角膜基质细胞向肌成纤维细胞分化。Y-27632将α-SMA阳性细胞从4%减少至0.3%2)。抑制纤维化瘢痕形成
- 角膜内皮：生理条件下有助于细胞骨架稳定和屏障功能维持。在氧化应激或炎症下，ROCK过度激活导致细胞收缩、连接破坏和凋亡2)。RKI通过增加细胞周期蛋白D和抑制p27Kip1磷酸化促进G1/S期进展，诱导CEC增殖3)
抗炎和抗血管新生作用
Section titled “抗炎和抗血管新生作用”ROCK通过NF-κB促进细胞因子产生和免疫细胞募集。RKI抑制该通路，减轻炎症和纤维化2)。在动物模型中，也有报道抑制角膜新生血管2)。在角膜移植模型中，通过增加调节性T细胞和抑制Th17反应减少排斥反应2)。
4. 使用的药物与安全性
Section titled “4. 使用的药物与安全性”利帕舒地尔（Glanatec®）
制剂：0.4%滴眼液。每日两次
特点：非选择性ROCK1/ROCK2抑制剂。2014年在日本获批用于青光眼和高眼压症3)。快速角膜渗透，角膜内作用约6小时2)
角膜应用：用于促进DSO术后角膜透明化。利帕舒地尔治疗的患者在DSO术后3、6、12个月时ECD高于对照组1)
奈他舒地尔（Rhopressa®）
制剂：0.02%滴眼液。每日一次
特点：双重作用药物，兼具ROCK1/ROCK2抑制和去甲肾上腺素转运体（NET）抑制2)。在美国和欧洲获批用于青光眼治疗
临床试验：在FECD患者的安慰剂对照双盲试验中，报告了中央角膜厚度的显著减少和BCVA的显著改善1)。
- 结膜充血：最常见的副作用。奈他舒地尔发生率为50-55%，利帕舒地尔为60-65%2)。通常为轻度、一过性，持续使用后减轻。
- 眼睑炎：利帕舒地尔更常见。12个月时约25%发生，是停药的最常见原因2)。特应性体质是危险因素。
- 角膜涡状混浊（cornea verticillata）：奈他舒地尔约20%发生2)。为淡褐色漩涡状上皮沉积，不导致视力下降，停药后消失。利帕舒地尔未见报道。
- 蜂窝状角膜病变（honeycomb keratopathy）：两种药物均有报道1)5)。易发生于角膜失代偿病例。多数停药后可逆。
Q
ROCK抑制剂的副作用中是否有影响视力的？
5. 标准临床应用
Section titled “5. 标准临床应用”DSO + ROCK抑制剂联合疗法
Section titled “DSO + ROCK抑制剂联合疗法”Descemet膜剥离术（DSO）是去除中央Descemet膜，期望通过周边健康CEC迁移实现内皮再生的术式3)。联合ROCK抑制剂可促进CEC迁移，加速角膜透明化1)。
在DSO + ROCK抑制剂联合疗法的研究中，DSO + 利帕舒地尔组（23例）中22例实现了角膜透明化1)。与DSO单独组（9例）相比，RKI组透明化显著更快，BCVA和中央角膜厚度改善也显著1)。
培养CEC + ROCK抑制剂的细胞疗法
Section titled “培养CEC + ROCK抑制剂的细胞疗法”Kinoshita等人开创性的临床试验中，实施了将添加Y-27632的培养人CEC注入前房的细胞疗法4)。研究对象为11例大疱性角膜病变患者，术后24周时10例患者的CEC密度达到≥1,000 cells/mm²4)。11例中10例的角膜水肿改善至≤630 μm4)。2年随访期间，无免疫反应，角膜透明度保持良好3)。
FECD患者白内障手术的围手术期使用
Section titled “FECD患者白内障手术的围手术期使用”FECD患者的白内障手术是角膜内皮损伤的高风险病例，70%的患者后续需要角膜移植1)。围手术期给予RKI可改善ECD并减少中央角膜厚度1)。一项针对48只眼的随机试验显示，与对照组相比，RKI组的ECD和中央角膜厚度有显著差异1)。
Q
ROCK抑制剂能否避免角膜移植？
A
对于早期至中度的FECD患者，DSO联合ROCK抑制剂治疗可实现角膜透明，部分病例可延迟或避免角膜移植1)。但对于伴有严重CEC减少的进展期病例，角膜移植（EK）仍是根本性治疗1)。ROCK抑制剂也是解决供体角膜短缺的细胞疗法的重要组成部分4)。
6. 病理生理学与详细发病机制
Section titled “6. 病理生理学与详细发病机制”FECD角膜内皮中ROCK的过度激活
Section titled “FECD角膜内皮中ROCK的过度激活”在FECD角膜内皮中，ROCK信号过度激活，导致细胞收缩性增加，增殖和迁移能力下降1)。氧化应激、线粒体功能障碍以及异常蛋白质/RNA加工参与其中，进展为caspase-3依赖性凋亡1)2)。
ROCK活性增强还参与细胞外基质（ECM）异常。FECD内皮细胞异常分泌胶原等基质蛋白，在Descemet膜上沉积为guttae1)。ROCK抑制可抑制这种病理性ECM产生1)。
ROCK抑制介导的内皮再生机制
Section titled “ROCK抑制介导的内皮再生机制”RKI松弛肌动球蛋白收缩，促进细胞伸展。通过上调细胞周期蛋白D激活G1/S期进程，诱导CEC增殖3)。Ripasudil刺激Rac1，上调Snail和Vimentin，显著增强CEC运动性2)。这可将通常静止的角膜内皮转化为修复表型2)。
ROCK抑制剂在CEC培养中的作用
Section titled “ROCK抑制剂在CEC培养中的作用”Y-27632有助于建立无动物源性病原体的CEC培养体系3)。添加RKI可使CEC产量增加1.96至3.36倍3)。已证实可增强细胞-基质粘附、促进增殖、提高存活率并改善冻存效果3)。
7. 最新研究与未来展望
Section titled “7. 最新研究与未来展望”ROCK抑制剂在角膜疾病中的应用正在迅速扩展。除利帕舒地尔和奈他舒地尔外，具有更高选择性的新型ROCK抑制剂（如ITRI-E-212、NRL-1049）正在开发中2)。ROCK2选择性抑制剂有望提高组织特异性并减少脱靶效应2)。
缓释制剂（纳米载体、原位凝胶系统）的开发也在推进，可减少给药频率并实现慢性角膜疾病的长期应用2)。
培养CEC联合ROCK抑制剂的细胞疗法被视为克服全球供体角膜短缺的创新方法3)4)。多项临床试验正在进行中，期待未来的长期安全性和有效性数据1)。
8. 参考文献
Section titled “8. 参考文献”- Jukić A, Pupić Bakrac A, Šapić Ivancić B, Kopić A, Meter A, Kasalica Zuzul R, Pavan J, Jukić T. Rho-Kinase Inhibitors in the Management of Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy: A Review. Medicina. 2025;61(5):772.
- Leong EYX, Ding J, Wu D, Lim BXH, Ang A, Wong E, Morlet N, Mehta JS, Lim CHL. A Comprehensive Review of the Role of Rho-Kinase Inhibitors in Corneal Diseases. Life. 2025;15(8):1283.
- Tone SO, Kocaba V, Böhm M, Wyber A, Kinoshita S, Jurkunas UV. Fuchs endothelial corneal dystrophy: A review. Prog Retin Eye Res. 2021;80:100898.
- Patel SV. Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty. Annu Rev Vis Sci. 2020;6:255-267.
- American Academy of Ophthalmology. Corneal Edema and Opacification Preferred Practice Pattern. Ophthalmology. 2019;126(1):P216-P285.