Autofluoresensi fundus (FAF) adalah metode diagnostik pencitraan non-invasif yang mengeksitasi fluorofor alami di fundus dengan cahaya dan memetakan emisinya7). Berbeda dengan angiografi fluoresein (FA), metode ini tidak memerlukan injeksi intravena zat kontras7).
Pada tahun 1995, karakteristik autofluoresensi retina manusia pertama kali dilaporkan7). Setelah itu, aplikasi klinis menyebar dengan cepat seiring meluasnya penggunaan oftalmoskop laser pemindai confocal (cSLO).
Fluorofor utama dalam autofluoresensi fundus adalah lipofuscin yang terakumulasi di dalam sel RPE7)6). Lipofuscin adalah produk sampingan dari degradasi lisosom yang tidak sempurna dari membran cakram segmen luar fotoreseptor, dan mengandung setidaknya 20 senyawa bisretinoid7).
A2E (N-retinilidena-N-retiniletanolamina), komponen utama, menyerap cahaya biru (puncak sekitar 470 nm) dan memancarkan cahaya kuning-hijau (600–610 nm)6)7). A2E menghasilkan spesies oksigen reaktif melalui fotooksidasi, yang menginduksi ketidakstabilan membran dan apoptosis7).
Absorpsi maksimum masing-masing bisretinoid adalah sebagai berikut7):
Fluorofor
Absorpsi maksimum
A2E
439 nm
A2PE
449 nm
isoA2E
426 nm
A2-DHP-PE
490 nm
Sel RPE memfagositosis sekitar 3 miliar cakram segmen luar fotoreseptor selama hidup 6). Setelah usia 70 tahun, LF dan melanolipofuscin terakumulasi hingga menempati sekitar 25% volume sitoplasma RPE6).
Pada fluoresensi spontan inframerah dekat (NIR-AF), melanin tereksitasi sebagai fluorofor utama dengan cahaya sekitar 787 nm 7)6). Hal ini memungkinkan evaluasi distribusi melanin di RPE dan koroid.
QApa perbedaan antara FAF dan FA (angiografi fluoresein)?
A
FA memerlukan injeksi intravena zat kontras dan mengevaluasi struktur pembuluh darah serta status sawar darah-retina. FAF tidak memerlukan zat kontras, menggunakan fluoresensi intrinsik lipofuscin di dalam RPE untuk menilai status metabolik RPE. Intensitas sinyal FAF lemah, sekitar 1/100 dari FA, tetapi secara langsung mencerminkan kerusakan RPE, memberikan informasi komplementer 7).
FAF digunakan dalam diagnosis dan pemantauan berbagai penyakit retina dan koroid.
Penyakit degeneratif dan atrofi
Degenerasi Makula Terkait Usia (AMD) dan Atrofi Geografis (GA): Tampak sebagai area hipofluoresen dengan batas jelas, ideal untuk pengukuran luas. Pola hiperfluoresen di sekitar GA berguna untuk memprediksi laju perkembangan.
Penyakit Stargardt: Ditandai dengan hiperfluoresen seperti flek dan hipofluoresen akibat atrofi fovea. qAF menunjukkan nilai fluoresen sekitar 3 kali lebih tinggi dari normal.
Retinitis Pigmentosa (RP): Cincin hiperfluoresen di sekitar makula yang menyusut seiring waktu sebagai indikator perkembangan.
Penyakit vaskular dan metabolik
Retinopati Diabetik (DR): Eksudat keras tampak hiperfluoresen, perdarahan hipofluoresen, edema makula kistik (CME) hiperfluoresen, berguna untuk deteksi perubahan dini.
Korioretinopati serosa sentral (CSC): Pada kasus kronis, fluoresensi berubah secara bertahap dari hiperfluoresensi titik menjadi hiperfluoresensi menyeluruh, kemudian menjadi hipofluoresensi parsial.
Penyakit Inflamasi dan Neoplastik
Uveitis (MEWDS, APMPPE, dll.): Hiperfluoresensi pada fase akut merupakan ciri khas. Beberapa temuan dapat menghilang dengan fotobleaching.
Melanoma koroid: Hiperfluoresensi pada pigmen oranye di atas tumor merupakan penanda transformasi ganas.
Untuk memprediksi progresi GA, digunakan klasifikasi IFAG (International FAF Classification Group), yang mengklasifikasikan menjadi 8 pola (normal, perubahan minimal, peningkatan fokal, bercak, linier, seperti renda, retikuler, berbintik) 6).
Kecepatan perkembangan setiap pola ditunjukkan di bawah ini 3)6):
Pola
Karakteristik
Kecepatan perkembangan (mm²/tahun)
Tidak ada/minimal
Tidak ada perubahan batas
Paling lambat
Diffuse trickling
Fluoresensi titik luas
Sekitar 2.61
Patchy/banded
Bercak/bergaris
Sedang
Hipofluoresensi pada area GA menunjukkan hilangnya RPE, sedangkan hiperfluoresensi di sekitarnya mencerminkan hipertrofi RPE, migrasi RPE yang terlepas, dan akumulasi makrofag 3).
Reticular pseudodrusen terdeteksi pada FAF sebagai bintik hipofluoresen berukuran 50–400 μm, dan lebih sensitif dibandingkan fotografi fundus warna 6).
Pada pemotretan B-FAF (FAF cahaya biru) standar, pasien dipasang pada alat setelah pupil dilebarkan (atau tanpa dilatasi), dan pemotretan dilakukan dengan fokus terbaik sambil memantau gambar langsung. Pada tipe cSLO, rasio signal-to-noise ditingkatkan dengan rata-rata beberapa frame.
Perlakuan pemutihan cahaya (photobleaching): Sinyal FAF dapat ditingkatkan sekitar 30% dengan paparan cahaya kuat selama sekitar 20 detik sebelum pemotretan, yang memutihkan pigmen visual2)1). Ini digunakan untuk mengevaluasi lesi akut seperti MEWDS.
FAF cahaya hijau (G-FAF): Metode pemotretan dengan eksitasi 504/532 nm, di mana penyerapan oleh pigmen makula lebih sedikit, memberikan evaluasi fovea yang sangat baik4)6). Kenyamanan pasien juga lebih tinggi.
QAlat apa yang paling sering digunakan?
A
Untuk pemeriksaan rawat jalan standar, tipe cSLO (seperti Spectralis) banyak digunakan. Untuk pemotretan sudut sangat lebar, Optos dipilih, dan untuk evaluasi fovea, perangkat G-FAF dipilih. Tipe cSLO yang dapat memotret bersamaan dengan OCT memiliki akurasi penyelarasan yang tinggi dalam pemantauan, dan cocok untuk evaluasi kuantitatif seperti pengukuran luas GA4)7).
Matteo Mario Carlà; Federico Giannuzzi; Francesco Boselli; Emanuele Crincoli; Stanislao Rizzo. Extensive macular atrophy with pseudodrusen-like appearance: comprehensive review of the literature. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2024 Aug 12; 262(10):3085-3097. Figure 2. PMCID: PMC11458735. License: CC BY.
Foto autofluoresensi fundus biru dari atrofi makula luas dengan pseudodrusen (EMAP), menunjukkan pola evolusi klasik. Lesi lobular hipoautofluoresen terlihat di area perifoveal, terutama perifovea superior (A). Lesi multifokal ini cenderung menyatu menjadi satu bercak atrofi gelap dan berbatas tegas, awalnya tidak mengenai fovea (B). Pada tahap lanjut, area atrofi berorientasi vertikal melibatkan daerah makula dan mengenai fovea (C). Perhatikan tepi hiperautofluoresen yang terlihat di batas lesi atrofi. Atas izin Antropoli dkk. [41], Romano dkk. [4] dan Vilela dkk. [9]
Temuan normal pada SW-AF (FAF gelombang pendek / B-FAF):
Hipofluoresensi fovea: Karena pigmen xantofil (pigmen makula) menyerap cahaya biru, fovea menunjukkan hipofluoresensi6)7).
Hipofloresensi diskus optikus: Karena tidak adanya RPE, maka menjadi hipofloresen 7).
Hipofloresensi pembuluh darah retina: Darah menyerap cahaya, sehingga menunjukkan hipofloresensi 7).
Area fluoresensi tertinggi: Area parafovea (5-15 derajat dari fovea) menunjukkan fluoresensi terkuat 6).
Temuan normal pada NIR-AF (Autofluoresensi Inframerah Dekat):
Karena fovea memiliki kepadatan melanin yang tinggi, pada NIR-AF justru tampak sebagai hiperfluoresensi 6)7). Ini adalah perbedaan penting dengan SW-AF.
Mekanisme terjadinya hiperfluoresensi diklasifikasikan menjadi peningkatan primer dan peningkatan sekunder2).
Peningkatan primer: Produksi berlebihan bisretinoid akibat disfungsi ABCA4 dan RDH12. Sesuai dengan penyakit Stargardt dan distrofi retina terkait RDH12.
Peningkatan sekunder: Akumulasi bisretinoid di hilir akibat kerusakan fotoreseptor. Terjadi sekunder akibat kematian fotoreseptor pada RP atau penyebab lainnya.
Diferensiasi dari photobleaching: Jika hiperfluoresensi menghilang setelah perawatan photobleaching, kemungkinan merupakan pseudo-hiperfluoresensi akibat fluoresensi dari pigmen visual (rhodopsin)1).
QApakah hiperfluoresensi selalu merupakan temuan patologis?
A
Hiperfluoresensi juga dapat muncul akibat penurunan pigmen makula (penuaan, paparan sinar matahari) atau fotobleaching. Periksa adanya perubahan struktural dengan OCT untuk membedakan dari hiperfluoresensi patologis sejati. Karena tampilan dapat berbeda antar perangkat, penting untuk menggunakan perangkat yang sama untuk perbandingan serial4)7).
Fluoresensi adalah fenomena di mana molekul yang menyerap foton memancarkan foton berenergi lebih rendah saat kembali dari keadaan tereksitasi ke keadaan dasar7). Cahaya yang dipancarkan selalu memiliki panjang gelombang lebih panjang (energi lebih rendah) daripada cahaya yang diserap (pergeseran Stokes).
Jalur pembentukan komponen utama LF, A2E, adalah sebagai berikut7)2):
Fotoisomerisasi 11-cis-retinal: all-trans-retinal dihasilkan saat fotoresepsi.
Reaksi dengan fosfatidiletanolamina (PE): all-trans-retinal berkondensasi dengan PE membentuk N-retinilidena-PE (NRPE).
NRPE → A2-GPE: Di dalam membran diskus, NRPE bereaksi dengan molekul all-trans-retinal kedua membentuk A2-GPE (prekursor A2E).
Hidrolisis A2-GPE → A2E: Setelah fagositosis membran diskus oleh RPE, A2-GPE dihidrolisis di lisosom menghasilkan A2E.
Peran ABCA4: Transporter ABC ABCA4 memindahkan NRPE ke sisi sitoplasma membran diskus, memfasilitasi reduksinya menjadi all-trans-retinol2). Defisiensi fungsi ABCA4 (penyebab penyakit Stargardt) menyebabkan NRPE tertahan di dalam membran diskus dan akumulasi berlebihan bisretinoid.
Melanin adalah zat fluoresen utama untuk NIR-AF (eksitasi 787 nm) dan terdistribusi di RPE dan koroid7)6). Penurunan melanin terkait usia diamati sebagai pelemahan sinyal NIR-AF. Melanolipofuscin (kompleks melanin dan LF) juga berkontribusi pada sinyal NIR-AF.
qAF adalah nilai fluoresensi kuantitatif yang dikoreksi menggunakan referensi fluoresen internal (zat fluoresen standar dalam kuvet) di bawah eksitasi 488 nm 2)7). Nilai qAF bervariasi menurut usia, eksentrisitas, jenis kelamin, dan ras, sehingga standardisasi menjadi tantangan.
FLIO adalah teknik yang mengukur kurva peluruhan fluoresensi (umur) spesifik untuk setiap zat fluoresen, dan dapat mengidentifikasi jenis zat fluoresen selain intensitas fluoresensi 6)7). Saat ini, penggunaannya terutama untuk penelitian.
qAF semakin banyak digunakan sebagai titik akhir dalam uji klinis untuk penyakit retina herediter seperti penyakit Stargardt dan retinitis pigmentosa, sebagai indikator objektif perkembangan penyakit 2). Standarisasi perangkat yang dikalibrasi dan protokol pengukuran masih menjadi tantangan.
Dalam uji klinis pengobatan GA menggunakan pegsetacoplan (APL-2) dan avacincaptad pegol (Zimura), pengukuran luas GA melalui pencitraan FAF telah diadopsi sebagai titik akhir utama 4). B-FAF cenderung melebih-lebihkan luas GA, sementara G-FAF dilaporkan lebih baik dalam mengevaluasi lesi sentral 4).
Model deteksi degenerasi makula terkait usia yang menggabungkan gambar FAF sudut lebar ekstrem Optos dengan algoritma deep learning telah dilaporkan, memungkinkan deteksi dini lesi dengan sensitivitas tinggi6).
Dalam klasifikasi otomatis penyakit retina herediter, jaringan saraf dilaporkan mampu membedakan penyakit Stargardt, penyakit Best, dan RP dengan akurasi sekitar 95%5).
G-FAF memiliki pengaruh pigmen makula foveal yang lebih sedikit dan unggul dalam mendeteksi lesi foveal yang sulit diamati dengan SW-AF4). G-FAF juga mengurangi silau pada pasien, sehingga lebih nyaman. Diharapkan penggunaannya akan meluas di masa depan.
Pencitraan fluoresensi seumur hidup (FLIO) menunjukkan pola fluoresensi spesifik penyakit pada degenerasi makula terkait usia, penyakit Stargardt, dan makulopati diabetik, dan berpotensi menangkap perubahan metabolik sebelum FAF berbasis intensitas 7).
Melalui pencitraan multimodal yang mengintegrasikan FAF, OCT, OCT-A, dan FA, sistem diagnostik yang saling melengkapi keterbatasan setiap metode pemeriksaan sedang dibangun 4).
QBagaimana perkembangan FAF di masa depan?
A
Prospek utama meliputi pemantauan penyakit kuantitatif melalui standarisasi qAF, diagnosis otomatis dengan AI dan pembelajaran mendalam (akurasi sekitar 95% untuk penyakit retina herediter), aplikasi klinis FLIO, dan penyebaran G-FAF 5)6). FAF telah diadopsi sebagai titik akhir utama dalam uji klinis obat terapi atrofi geografis, dan kepentingannya dalam praktik retina diperkirakan akan semakin meningkat di masa depan 4).
Mantovani A, Corbelli E, Sacconi R, et al. Blue-light fundus autofluorescence in inflammatory photoreceptor diseases. Diagnostics. 2023;13(14):2466.
Parmann R, Bhatt M, Sarraf D, et al. Primary versus secondary autofluorescence elevations in inherited retinal dystrophies. Int J Mol Sci. 2023;24(15):12327.
Curcio CA, Meleth AD, Gelman R, et al. FAF variation in geographic atrophy: clinicopathologic correlation. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2025;66(1):49.
Ranetti AE, Ranetti MO, Pop A, et al. Blue-light and green-light fundus autofluorescence in age-related macular degeneration. Diagnostics. 2025;15(13):1688.
Oh J, Lee CS, Kim JM, et al. Fundus autofluorescence in inherited retinal disease. J Clin Med. 2025;14(7):2293.
Sahinoglu Kekek E, Sermet F. Fundus autofluorescence in dry age-related macular degeneration. Turk J Ophthalmol. 2021;51(3):169-176.
Pole C, Ameri H. Fundus autofluorescence and clinical applications. J Ophthalmic Vis Res. 2021;16(3):432-461.
Salin teks artikel dan tempelkan ke asisten AI pilihan Anda.
Artikel disalin ke papan klip
Buka asisten AI di bawah, lalu tempelkan teks yang disalin ke kotak chat.
