CLAu (कंजंक्टिवल लिंबल ऑटोग्राफ्ट)
संकेत : एकतरफा LSCD
विधि : स्वस्थ आँख के लिंबल कंजंक्टिवा से 2-4 घंटे के बराबर ऊतक लेकर रोगग्रस्त आँख के लिंबस पर प्रत्यारोपित किया जाता है
लाभ : एक चरण की शल्य चिकित्सा में पूर्ण, संवर्धन सुविधा की आवश्यकता नहीं
कॉर्नियल उपकला की स्टेम कोशिकाएँ कॉर्निया और कंजंक्टिवा के जंक्शन, लिंबस में स्थित होती हैं। लिंबस की पैलिसेड्स ऑफ वोग्ट (POV) स्टेम कोशिकाओं के लिए एक विशेष सूक्ष्म वातावरण (निच) के रूप में कार्य करती हैं, जो कॉर्नियल उपकला की होमियोस्टेसिस को बनाए रखती हैं।
जब ये लिंबल स्टेम कोशिकाएँ व्यापक रूप से क्षतिग्रस्त हो जाती हैं, तो लिंबल स्टेम सेल की कमी (LSCD) उत्पन्न होती है। LSCD में, कॉर्नियल उपकला का पुनर्जनन असंभव हो जाता है और कंजंक्टिवल उपकला कॉर्निया की सतह पर आक्रमण करती है (कंजंक्टिवलाइज़ेशन) 4)। इसके परिणामस्वरूप, कॉर्नियल अपारदर्शिता, सतही नव-रक्त वाहिका निर्माण और दृष्टि हानि बढ़ती है।
पारंपरिक कॉर्निया प्रत्यारोपण LSCD में अप्रभावी है, क्योंकि ग्राफ्ट की सतह फिर से कंजंक्टिवलाइज़ हो जाती है और विफल हो जाती है 3)। इसलिए, सामान्य कॉर्नियल उपकला स्टेम कोशिकाओं को पुनःस्थापित करने और नेत्र सतह को स्थिर करने के लिए नेत्र सतह पुनर्निर्माण आवश्यक है।
पुनर्निर्माण का लक्ष्य दृष्टि बहाली नहीं बल्कि नेत्र सतह का स्थिरीकरण है। यदि कॉर्नियल स्ट्रोमा में अपारदर्शिता बनी रहती है, तो नेत्र सतह स्थिरीकरण के बाद दो चरणों में पूर्ण मोटाई कॉर्निया प्रत्यारोपण (PKP) या गहरी लैमेलर कॉर्निया प्रत्यारोपण (DALK) किया जाता है।
वे रोगी जिनमें कॉर्नियल लिंबस की स्टेम कोशिकाएं व्यापक रूप से क्षतिग्रस्त हो गई हैं और कंजंक्टिवल एपिथेलियम कॉर्निया पर आक्रमण कर रहा है, इसके लिए पात्र हैं। सामान्य कारणों में रासायनिक जलन, स्टीवंस-जॉनसन सिंड्रोम, ओकुलर पेम्फिगॉइड और एनिरिडिया शामिल हैं। हल्के मामलों में जहां कंजंक्टिवल आक्रमण केवल परिधि तक सीमित है, पहले निगरानी की जाती है।

LSCD की गंभीरता को डेंग के अंतर्राष्ट्रीय वर्गीकरण 1) के अनुसार निम्नलिखित तीन चरणों में वर्गीकृत किया गया है।
| वर्गीकरण | कंजंक्टिवलाइजेशन की सीमा | केंद्रीय कॉर्निया |
|---|---|---|
| स्टेज I | लिंबस का 50% से कम | गैर-आक्रामक |
| स्टेज II | लिंबस का 50% या अधिक | गैर-आक्रामक |
| स्टेज III | पूर्ण परिधीय | केंद्रीय आक्रमण |
मुख्य नैदानिक निष्कर्ष इस प्रकार हैं:
LSCD के कारण विविध हैं, लेकिन रासायनिक जलन सबसे आम है। ऑटोलॉगस लिंबल ट्रांसप्लांट की व्यवस्थित समीक्षा में, 88% प्रभावित आँखों में रासायनिक जलन थी3)।
मुख्य कारण नीचे दिए गए हैं।
यह सबसे बुनियादी निदान विधि है। POV का गायब होना, कंजक्टिवलाइजेशन की सीमा और सतही नववाहिकीकरण की डिग्री का मूल्यांकन किया जाता है। सामान्यतः, ऊपरी और निचले लिंबस में POV आसानी से देखा जा सकता है, लेकिन 10 वर्ष से कम और 70 वर्ष से अधिक आयु में देखना मुश्किल हो सकता है।
कॉर्नियल उपकला दोष की सीमा को दृश्यमान बनाता है। कंजंक्टिवलाइज़्ड क्षेत्र बिंदीदार धुंधलापन पैटर्न दिखाते हैं।
कॉर्निया की सतह से कोशिकाएँ लेकर इम्यूनोस्टेनिंग की जाती है। कॉर्नियल उपकला मार्कर साइटोकेराटिन 3 (CK3)/CK12 का गायब होना और कंजंक्टिवल उपकला मार्कर CK13/MUC5AC का व्यक्त होना LSCD के निश्चित निदान में उपयोगी है1)।
कॉर्नियल उपकला की मोटाई और संरचनात्मक परिवर्तनों का गैर-आक्रामक मूल्यांकन कर सकता है। कंजंक्टिवलाइज़्ड क्षेत्र सामान्य कॉर्नियल उपकला से भिन्न परावर्तन पैटर्न दिखाते हैं।
कोशिकीय स्तर पर POV संरचनाओं और बेसल कोशिकाओं की आकृति का अवलोकन कर सकता है। कॉर्नियल और कंजंक्टिवल उपकला के भेद में भी उपयोगी है, लेकिन जाँच उपकरण केवल सीमित सुविधाओं में उपलब्ध है।
उपचार का चयन एकतरफा या द्विपक्षीय होने पर बहुत भिन्न होता है। एकतरफा LSCD में स्वस्थ आँख के लिंबस से स्व-ऊतक लिया जा सकता है, लेकिन द्विपक्षीय LSCD में स्व-लिंबल ऊतक उपलब्ध नहीं होता, इसलिए मौखिक म्यूकोसा उपकला जैसे वैकल्पिक कोशिका स्रोतों का उपयोग किया जाता है।
CLAu (कंजंक्टिवल लिंबल ऑटोग्राफ्ट)
संकेत : एकतरफा LSCD
विधि : स्वस्थ आँख के लिंबल कंजंक्टिवा से 2-4 घंटे के बराबर ऊतक लेकर रोगग्रस्त आँख के लिंबस पर प्रत्यारोपित किया जाता है
लाभ : एक चरण की शल्य चिकित्सा में पूर्ण, संवर्धन सुविधा की आवश्यकता नहीं
SLET (सरलीकृत लिंबल एपिथेलियल प्रत्यारोपण)
संकेत : एकतरफा LSCD
विधि : स्वस्थ आंख से लिंबल ऊतक का एक छोटा टुकड़ा लेकर एमनियोटिक झिल्ली पर फैलाकर प्रत्यारोपित किया जाता है
लाभ : कम मात्रा में ऊतक लेना, स्वस्थ आंख पर कम बोझ
CLET (संवर्धित लिंबल एपिथेलियल प्रत्यारोपण)
संकेत : एकतरफा (थोड़ा ऊतक लेना) या जीवित दाता से एलोग्राफ़्ट
विधि : लिंबल एपिथेलियल कोशिकाओं को ex vivo में संवर्धित करके शीट के रूप में प्रत्यारोपित किया जाता है
लाभ : बहुत छोटे ऊतक से बड़ी शीट बनाना संभव
COMET (संवर्धित मौखिक म्यूकोसल एपिथेलियल प्रत्यारोपण)
संकेत : द्विपक्षीय LSCD
विधि : रोगी के स्वयं के मौखिक म्यूकोसा की एपिथेलियल कोशिकाओं को संवर्धित करके शीट के रूप में प्रत्यारोपित किया जाता है
लाभ : ऑटोग्राफ़्ट होने के कारण अस्वीकृति की संभावना कम, द्विपक्षीय मामलों में भी लागू
Shanbhag एट अल.3) की एक व्यवस्थित समीक्षा में ऑटोलॉगस लिंबल स्टेम सेल प्रत्यारोपण की तीन विधियों की तुलना इस प्रकार की गई है।
| शल्य चिकित्सा पद्धति | शारीरिक सफलता दर | कार्यात्मक सफलता दर |
|---|---|---|
| CLAu | 69% | 60% |
| SLET | 78% | 69% |
| CLET | 61% | 52% |
CLAu की 22 केस सीरीज़ (1023 आंखें), SLET की 4 अध्ययन (253 आंखें), CLET की 8 अध्ययन (581 आंखें) का विश्लेषण। CLAu के 88% और CLET/SLET के 90% से अधिक मामले रासायनिक जलन के थे। SLET और CLAu ने CLET की तुलना में शारीरिक सफलता दर काफी अधिक दिखाई। 3)
मजुमदार एट अल. ने क्षारीय चोट के कारण एकतरफा LSCD के एक मामले की रिपोर्ट की, जिसमें एक ही चरण में SLET और कंजंक्टिवल ऑटोग्राफ्ट किया गया। 2)
24 वर्षीय पुरुष, क्षारीय चोट के बाद स्टेज III LSCD। पोस्टऑपरेटिव दिन 24 पर कॉर्नियल एपिथेलियलाइजेशन पूरा हुआ, और 24 महीने के फॉलो-अप में सर्वश्रेष्ठ सुधारित दृश्य तीक्ष्णता (BCVA) 6/12p प्राप्त हुई। एकल-चरण सर्जरी द्वारा कंजंक्टिवल दोष की मरम्मत और लिंबल पुनर्निर्माण एक साथ करने का लाभ दिखाया गया। 2)
यदि नेत्र सतह पुनर्निर्माण के बाद कॉर्नियल स्ट्रोमल अपारदर्शिता बनी रहती है, तो पूर्ण-मोटाई कॉर्नियल प्रत्यारोपण या DALK जोड़ा जाता है। एंडोथेलियल अस्वीकृति से बचने के लिए DALK बेहतर है। दीर्घकालिक इम्यूनोसप्रेसिव दवाओं (साइक्लोस्पोरिन, टैक्रोलिमस) की आवश्यकता हो सकती है।
एकतरफा मामलों में, स्वस्थ विपरीत आंख के लिंबस से कॉर्नियल उपकला स्टेम कोशिकाएं ली जा सकती हैं। द्विपक्षीय मामलों में, दोनों आंखों का लिंबस क्षतिग्रस्त होता है, इसलिए कॉर्नियल उपकला स्टेम कोशिकाएं नहीं ली जा सकतीं। इसलिए मौखिक म्यूकोसा उपकला जैसे वैकल्पिक कोशिका स्रोत का उपयोग करके संवर्धित प्रत्यारोपण (COMET) चुना जाता है।
नेत्र सतह पुनर्निर्माण का मुख्य उद्देश्य नेत्र सतह को स्थिर करना है, और यह सीधे दृष्टि सुधार की गारंटी नहीं देता है। यदि कॉर्नियल स्ट्रोमा में धुंधलापन है, तो पुनर्निर्माण के बाद कॉर्निया प्रत्यारोपण सहित दो-चरणीय उपचार आवश्यक है। दृष्टि में सुधार में कई महीनों से लेकर एक वर्ष से अधिक समय लग सकता है।
कॉर्नियल उपकला स्टेम कोशिकाएं लिंबस की बेसल परत में POV के भीतर स्थित होती हैं। POV स्ट्रोमा के पैपिलरी प्रक्षेपणों से बने होते हैं, जिनमें रक्त वाहिकाओं और तंत्रिकाओं का समृद्ध वितरण होता है। यह सूक्ष्म वातावरण (निच) स्टेम कोशिकाओं के स्व-नवीकरण और विभेदन को नियंत्रित करता है।
स्टेम कोशिकाएं असममित विभाजन द्वारा स्व-नवीकरण करती हैं, साथ ही क्षणिक प्रवर्धक कोशिकाएं (TAC) उत्पन्न करती हैं। TAC कॉर्निया के केंद्र की ओर बढ़ते हुए विभाजित और विभेदित होती हैं, अंततः कॉर्नियल उपकला कोशिकाएं बनकर सतह से झड़ जाती हैं।
जब लिंबल स्टेम कोशिकाएं क्षतिग्रस्त हो जाती हैं, तो निम्नलिखित स्थितियां श्रृंखलाबद्ध रूप से बढ़ती हैं।
कंजंक्टिवलाइज़्ड कॉर्नियल सतह की बैरियर कार्यक्षमता कम हो जाती है, जिससे बार-बार लगातार एपिथेलियल दोष होते हैं। लगातार सूजन से स्ट्रोमल पिघलना या छिद्रण भी हो सकता है।
COMET (संवर्धित ओरल म्यूकोसल एपिथेलियल ट्रांसप्लांटेशन) में तापमान-प्रतिक्रियाशील संवर्धन प्लेट मुख्य तकनीक है1)। संवर्धन प्लेट की सतह पर पॉली(एन-आइसोप्रोपाइल एक्रिलामाइड) कोटिंग 37°C पर हाइड्रोफोबिक होती है और तापमान कम करने पर हाइड्रोफिलिक में बदल जाती है। यह एंजाइम उपचार के बिना कोशिका शीट को प्लेट से अलग करने की अनुमति देता है, जिससे अंतरकोशिकीय जंक्शन और मैट्रिक्स को बनाए रखते हुए प्रत्यारोपण संभव होता है1)।
PMC10219018 के COMET मामले में, प्रत्यारोपण के बाद शीट और ऊतकों का इम्यूनोहिस्टोकेमिकल मूल्यांकन किया गया1)।
जापान में जून 2021 में दुनिया का पहला COMET उत्पाद Ocural® बीमा कवरेज में शामिल किया गया था 1)। Ocural® बिना सिम्बलफेरॉन (पलक-नेत्रगोलक आसंजन) के द्विपक्षीय LSCD के लिए संकेतित है। सिम्बलफेरॉन वाले मामलों के लिए Sakracy® चुना जाता है 1)।
Toshida एट अल. ने Ocural® के दो मामलों के प्रारंभिक परिणामों की सूचना दी। मामला 1 एक 79 वर्षीय पुरुष (द्विपक्षीय चरण III LSCD) था, मामला 2 भी द्विपक्षीय LSCD था, और दोनों में ग्राफ्ट लगने की पुष्टि हुई। प्रत्यारोपित शीट में p63, p75NTR और Ki-67 की अभिव्यक्ति पाई गई, जो स्टेम सेल विशेषताओं और प्रसार क्षमता के रखरखाव को दर्शाता है। 1)
एकपक्षीय LSCD के लिए Nepic® (संवर्धित स्वयं लिंबल उपकला कोशिका शीट) का उपयोग किया जा सकता है 1)।
यूरोप में, Holoclar® को पहली बार EU दवा के रूप में संवर्धित स्वयं लिंबल उपकला प्रत्यारोपण के लिए अनुमोदित किया गया था 1)। यह LSCD उपचार में पुनर्योजी चिकित्सा का अग्रदूत है, और जापानी Ocural® से भिन्न दृष्टिकोण (लिंबल उपकला-व्युत्पन्न बनाम मौखिक म्यूकोसा उपकला-व्युत्पन्न) अपनाता है।
Mazumdar एट अल. की रिपोर्ट में, SLET और कंजंक्टिवल ऑटोग्राफ्ट (CAG) को एक चरण में संयोजित करके कंजंक्टिवल दोष की मरम्मत और लिंबल पुनर्निर्माण एक साथ प्राप्त किया गया। पोस्टऑपरेटिव दिन 24 पर पूर्ण उपकलाकरण हुआ, और 24 महीनों में BCVA 6/12p तक सुधर गया। 2)
पारंपरिक SLET में कंजंक्टिवल दोष को उजागर स्क्लेरा पर छोड़ दिया जाता था या एमनियन से ढक दिया जाता था, लेकिन CAG के एक साथ प्रदर्शन से प्रारंभिक कंजंक्टिवल कवरेज और स्थिर नेत्र सतह प्राप्त हो सकती है 2)।
Shanbhag एट अल. की व्यवस्थित समीक्षा (1857 आंखें) में, कुल मिलाकर ऑटोलॉगस लिंबल ट्रांसप्लांटेशन की शारीरिक सफलता दर 69% और कार्यात्मक सफलता दर 61% थी। तकनीक के अनुसार, SLET और CLAu ने CLET की तुलना में काफी बेहतर परिणाम दिखाए। हालांकि, अध्ययन की गुणवत्ता और नमूना आकार में समूहों के बीच महत्वपूर्ण अंतर थे, जिससे व्याख्या में सावधानी बरतने की आवश्यकता है। 3)
भविष्य में यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षणों और दीर्घकालिक परिणामों के संचय की आवश्यकता है। iPS कोशिका-व्युत्पन्न कॉर्नियल उपकला कोशिका शीट जैसी अगली पीढ़ी की कोशिका चिकित्सा भी अनुसंधान चरण में है।
संवर्धित मौखिक म्यूकोसा उपकला कोशिका शीट (CAOMECS) की सूचना 2004 में दी गई थी, और द्विपक्षीय LSCD के लिए ऑटोलॉगस ग्राफ्ट के रूप में इसकी प्रभावशीलता की पुष्टि की गई है। हालांकि, दीर्घकालिक अनुवर्ती में, कॉर्नियल परिधि से संवहनी आक्रमण के कारण पुनः धुंधलापन कुछ मामलों में देखा गया है। कॉर्नियल उपकला और मौखिक म्यूकोसा उपकला के बीच प्रकृति में अंतर को कारण माना जाता है, और कट्टरपंथी उपचार के लिए कॉर्नियल उपकला कोशिकाओं का स्वयं उपयोग अधिक वांछनीय माना जाता है।
लिंबल स्टेम कोशिकाओं के अलावा अन्य कोशिका स्रोतों का उपयोग करके कॉर्नियल पुनर्जनन पर शोध आगे बढ़ रहा है।
कॉर्नियल स्ट्रोमा में भी अग्रदूत कोशिकाओं की उपस्थिति दिखाई गई है, और कॉर्नियल एंडोथेलियम के लिए बुलस केराटोपैथी आदि के लिए एक नए उपचार के रूप में शोध आगे बढ़ रहा है।
हां, 2021 में COMET उत्पाद Ocural® को बीमा कवरेज में शामिल किया गया था। हालांकि, इसका उपयोग केवल उन संस्थानों में किया जा सकता है जहां जापान कॉर्निया सोसायटी और जापान कॉर्नियल ट्रांसप्लांट सोसायटी के सदस्य और निर्धारित प्रशिक्षण पूरा कर चुके नेत्र विशेषज्ञ हों। संकेत मध्यम से गंभीर लिंबल स्टेम सेल की कमी है।