Gözyaşında toplam IgE ve alerjen antikor testi (alerji kan testi kiti)
1. Gözyaşı total IgE ve alerjen antikoru testleri nedir?
Section titled “1. Gözyaşı total IgE ve alerjen antikoru testleri nedir?”Alerjik konjonktival hastalıkların tanısı, Alerjik Konjonktival Hastalıklar Klinik Uygulama Kılavuzu (3. baskı)1) uyarınca üç aşamada sınıflandırılır.
| Tanı düzeyi | Gerekli bulgular |
|---|---|
| Klinik tanı | Yalnızca klinik bulgular |
| Klinik kesin tanı | Klinik bulgular + alerjik yatkınlık (gözyaşında total IgE, deri testi, serum alerjene özgü IgE) |
| Kesin tanı | Klinik bulgular + gözde lokal alerjik reaksiyon (eozinofil testi) |
Bu yazıda açıklanan “gözyaşında total IgE ve alerjen antikor testi”, bu tanı sistemini destekleyen test grubunun genel adıdır. Gözyaşında total IgE testi, gözdeki lokal alerjik yatkınlığı poliklinikte aynı gün hızla doğrulayabilir ve klinik kesin tanı için kullanılır. Serum alerjene özgü IgE antikor testi ve deri testi, sistemik alerjik yatkınlığı doğrulamak ve sorumlu alerjeni belirlemek için kullanılır. Kesin tanı için konjonktiva kazıntı yaymasında eozinofil testi gerekir.
Alerjik konjonktival hastalık, özellikle sedir polenine bağlı saman nezlesi ile ilişkili olarak yaygındır ve 2017 yılındaki bir araştırmada ülke genelindeki göz hastalıkları merkezlerine başvuran hastaların yaklaşık %15–20’sinde alerjik konjonktival hastalık saptanmıştır3). Uygun testlerin seçilmesi ve tanı sisteminin anlaşılması, doğru sınıflandırma ve tedaviye yol açar.
Poliklinikte aynı gün gözde lokal alerjik yatkınlık olup olmadığını gösterebilir. Alerwatch Tear IgE, immünokromatografi kullanan hızlı tanı kitidir ve sonuç pozitif ya da zayıf pozitif ise “gözde lokal alerjik yatkınlık var” şeklinde tanı konur. Klinik bulgularla birlikte klinik kesin tanıya yardımcı olur. Kesin tanı için ayrıca eozinofil testi gerekir.
2. Gözyaşında total IgE testi (Alerwatch)
Section titled “2. Gözyaşında total IgE testi (Alerwatch)”
Test kiti ve prensip
Section titled “Test kiti ve prensip”Gözyaşı total IgE, immünokromatografiye dayalı hızlı tanı kiti (Allerwatch Tear IgE, Wakamoto Pharmaceutical / Minaris Medical) kullanılarak test edilir. İmmünokromatografide gözyaşındaki IgE, şerit üzerindeki kolloidal altınla işaretli anti-insan IgE antikoruna bağlanır ve kapiller etkiyle test çizgisindeki immobilize antikor tarafından tutulur; böylece renkli bir çizgi oluşur.
Test prosedürü
Section titled “Test prosedürü”- Gözyaşı toplamak için test şeridini alt konjonktival keseye yerleştirin
- Test şeridini açın
- Test çizgisi ve kontrol çizgisini gözle okuyun ve sonucu belirleyin
Sonuç değerlendirmesi
Section titled “Sonuç değerlendirmesi”Sonuçlar pozitif, zayıf pozitif, negatif ve belirlenemez olmak üzere dört düzeyde değerlendirilir. Pozitif veya zayıf pozitif sonuç, “gözde lokal alerjik yatkınlık” olarak tanımlanır.
Hastalık tipine göre pozitiflik oranı
Section titled “Hastalık tipine göre pozitiflik oranı”Hastalık tipine göre gözyaşı total IgE pozitiflik oranları aşağıda gösterilmiştir2).
| Hastalık tipi | Pozitiflik oranı (pozitif vaka sayısı / toplam vaka sayısı) |
|---|---|
| SAC (mevsimsel alerjik konjonktivit) | 61.9%（52/84） |
| PAC (pereniyal alerjik konjonktivit) | 65.4%（34/52） |
| AKC (atopik keratokonjonktivit) | 80.5%（33/41） |
| VKC (vernal keratokonjonktivit) | 94.7%（36/38） |
| GPC (dev papiller konjonktivit) | 75.0%（6/8） |
| Toplam | 72.2%（161/223） |
SAC/PAC’te pozitiflik oranı yalnızca %60–65 düzeyinde kaldığı için yalancı negatif oranı yaklaşık %35–38’e ulaşır. Gözyaşı IgE testi negatif olsa bile, klinik bulgularla birlikte bütüncül değerlendirme yapmak önemlidir2).
Evet. SAC (mevsimsel alerjik konjonktivit) ve PAC (perenyal alerjik konjonktivit) için pozitiflik oranı yaklaşık %60–65’tir ve olguların yaklaşık %35–38’inde yalancı negatif görülür. Yalnızca gözyaşı IgE testine dayanarak tanı koymanın sınırlamaları olduğundan, klinik bulgular (göz kapağı ve konjonktiva kızarıklığı, papiller hipertrofi, kaşıntı vb.) ile serum antijen-spesifik IgE birlikte değerlendirilerek bütüncül karar verilmesi önemlidir.
3. Serum antijen-spesifik IgE antikor düzeyi testi
Section titled “3. Serum antijen-spesifik IgE antikor düzeyi testi”Test yöntemi
Section titled “Test yöntemi”Kan alınır ve kandaki antijen-spesifik IgE antikorları vücut dışında (in vitro) ölçülür. Sistemik alerjik yatkınlığı doğrulamak ve sorumlu antijeni belirlemek için kullanılır.
Test maddeleri, alerjik konjonktival hastalığı olan hastalarda pozitiflik oranı yüksek olan akar, ev tozu, sedir, orchard grass, timothy grass ve diğerlerinden seçilir. Sigorta kapsamında bir seferde en fazla 13 madde yer alır.
Tarama testi
Section titled “Tarama testi”Aşağıdaki testler, birden fazla maddeyi aynı anda ölçebilen tarama testleri olarak kullanılabilir.
- View Allergy 39 (Thermo Fisher Diagnostics): 39 maddeyi aynı anda ölçebilir. Sigorta kapsamında
- Mast Immunosystems V (Minaris Medical): birden fazla maddenin eşzamanlı ölçümü mümkündür. Sigorta kapsamında
Bu testler, sorumlu antijenin henüz daraltılmadığı ilk başvuru olgularında tarama için yararlıdır.
Sonuçların yorumlanması
Section titled “Sonuçların yorumlanması”Serumda herhangi bir antijen-spesifik IgE antikor düzeyinin pozitif olduğu bir bulgu varsa, bu durum sistemik alerjik yatkınlık olarak değerlendirilir. Antijen-spesifik IgE antikorları, hastanın hangi antijenlere duyarlı olduğunu gösterir; ancak neden olan antijen, antikor düzeyi ile klinik belirtiler birlikte değerlendirilerek belirlenmelidir (örneğin polen mevsiminde belirtilerin kötüleşmesi, kapalı ortamla ilişkisi gibi).
Duyarlılığı doğrulanan antijenin gerçek belirtilerle uyuşmaması durumunda, birden fazla antijene duyarlılık ya da uzun süreli duyarlanmaya bağlı antikor düzeyinde azalma da dikkate alınmalıdır.
4. Deri testleri (prik testi ve scratch testi)
Section titled “4. Deri testleri (prik testi ve scratch testi)”Yöntem
Section titled “Yöntem”Ani tip alerjik reaksiyonları değerlendiren deri testlerinin iki türü vardır: prik testi ve scratch testi. Test antijenleri, klinik belirtilerden şüphelenilen birkaç antijen arasından seçilerek uygulanır. Test sırasında, yanlış negatifleri kontrol etmek için pozitif kontrol ve mekanik ürtiker olmadığını doğrulamak için negatif kontrolün aynı anda yapılması önemlidir.
- Prik testi: alerjen solüsyonu ön kolun fleksör tarafındaki deriye damlatılır ve özel bir iğne ile deri delinerek antijen verilir
- Scratch testi: özel bir cihazla deride yüzeysel bir çizik oluşturulur, ardından alerjen solüsyonu sürülerek deriye nüfuz etmesi sağlanır
Değerlendirme ölçütleri
Section titled “Değerlendirme ölçütleri”Kabarcığın en uzun çapı ile bunun orta noktasından geçen dik çapın ortalaması reaksiyonun büyüklüğü olarak alınır. Kabarcık çapının 3 mm veya daha fazla olması ya da reaksiyonun pozitif kontrol kabarcığının en az yarısı kadar olması pozitif kabul edilir. Değerlendirme genellikle 15–20 dakika sonra yapılır.
Kontrendikasyonlar ve dikkat edilmesi gerekenler
Section titled “Kontrendikasyonlar ve dikkat edilmesi gerekenler”Histamin H₁ reseptör antagonistleri (antihistaminikler) ve trisiklik antidepresanlar cilt testi sonuçlarını etkileyebilir. Bu ilaçları kullanan hastalarda, test öncesinde ilaç kesme süresi tanıyın ya da serumda alerjene özgü IgE testine geçin.
Testin güvenilirliğini doğrulamak için pozitif ve negatif kontrolü aynı anda uygulayın. Kontrolsüz bronşiyal astımı olan veya anafilaksi riski taşıyan hastalarda, işlemin yapılıp yapılmayacağını dikkatle değerlendirin ve serum IgE testine geçmeyi düşünün. Antihistaminikler ve trisiklik antidepresanlar sonuçları etkilediği için, test öncesinde kullanılan ilaçların kontrol edilmesi zorunludur.
5. Testlerin karşılaştırılması ve hangisinin ne zaman kullanılacağı
Section titled “5. Testlerin karşılaştırılması ve hangisinin ne zaman kullanılacağı”Dört testin özelliklerinin karşılaştırılması
Section titled “Dört testin özelliklerinin karşılaştırılması”| Test | Değerlendirme konusu | VKC’de duyarlılık | Sigorta kapsamı | Özellikler |
|---|---|---|---|---|
| Gözyaşında toplam IgE (Allerwatch) | Gözde lokal alerjik yatkınlık | 94.7% | Var, kolay | Ayaktan hastanede aynı gün değerlendirilebilir |
| Serum alerjen-özgül IgE | Sistemik alerjik yatkınlık ve neden olan antijenin belirlenmesi | — | Var (en fazla 13 madde) | Neden olan antijenin belirlenmesinde yararlıdır |
| Deri testi | Sistemik alerjik yatkınlık | — | Var | Anafilaksi riski |
| Eozinofil testi | Gözde lokal alerjik reaksiyon | — | var | kesin tanı için gereklidir |
Klinik uygulamada test akışı
Section titled “Klinik uygulamada test akışı”Klinik uygulamada temel test yaklaşımı aşağıda gösterilmiştir1).
- Klinik bulgularla alerjiden şüphelenin (klinik tanı): kaşıntı, kızarıklık ve papilla artışı gibi bulguları değerlendirin
- Alerjik yatkınlığı doğrulayın (klinik kesin tanı): gözyaşı IgE’si veya serum alerjen-spesifik IgE ile yatkınlığı doğrulayın. Nedene olan alerjeni belirlemek istenirse serum IgE yararlıdır
- Gerektiğinde kesin tanı koyun (kesin tanı): eozinofil testi ile gözde lokal alerjik reaksiyonu doğrulayın
Gözyaşı IgE testi, poliklinikte aynı gün sonuç vermesi açısından avantajlıdır; ancak SAC/PAC’de yanlış negatiflere dikkat edilmelidir. Anafilaksi riski veya başka nedenlerle deri testi zor ise, serum alerjen-spesifik IgE testine geçilir.
6. Test ilkesinin ayrıntıları ve eozinofil testi
Section titled “6. Test ilkesinin ayrıntıları ve eozinofil testi”IgE ve ani alerjik reaksiyon
Section titled “IgE ve ani alerjik reaksiyon”IgE, ani (Tip I) alerjik reaksiyonda temel immünoglobulindir. Duyarlanmış mast hücreleri ve bazofillerin yüzeyindeki yüksek afiniteli IgE reseptörü (FcεRI) üzerinden bağlanır. Antijen yeniden girdiğinde IgE çapraz bağlanır, degranülasyon olur ve histamin ile lökotrienler gibi inflamatuvar mediyatörler salınır.
Gözde, konjonktivada çok sayıda mast hücresi bulunur ve bu reaksiyon kızarıklık, kaşıntı ve göz yaşarması gibi alerji belirtilerine yol açar. Gözyaşındaki toplam IgE düzeyi, gözdeki lokal duyarlanma derecesini yansıtır.
İmmüno-kromatografinin prensibi
Section titled “İmmüno-kromatografinin prensibi”AllerWatch gözyaşı IgE’de kullanılan immünokromatografi yönteminin prensibi şöyledir.
- Gözyaşındaki IgE, şerit üzerindeki altın kolloid ile işaretli insan anti-IgE antikoru ile bağlanır
- Kılcal etkiyle şerit boyunca ilerler
- Test çizgisindeki sabitlenmiş antikor IgE’yi yakalar ve renkli bir çizgi oluşturur
- IgE belirli bir miktarın üzerindeyse renkli çizgi görünür hale gelir ve pozitif olarak değerlendirilir
Serum IgE ölçüm yöntemleri
Section titled “Serum IgE ölçüm yöntemleri”Serumda antijene özgü IgE ölçümü için aşağıdaki yöntemler kullanılır.
- ImmunoCAP yöntemi (floresan enzim immün ölçümü): en yaygın kullanılan kantitatif yöntem. Çok az örnekle yüksek duyarlılıkta ölçüm yapılabilir
- MAST yöntemi (CAP-RAST yöntemi): immobilize alerjen kullanan saptama yöntemi
- Nicel değerler UA/mL (veya kU/L) olarak ifade edilir ve genellikle 0,35 kU/L ve üzeri pozitif kabul edilir
Eozinofil testi (kesin tanı)
Section titled “Eozinofil testi (kesin tanı)”Eozinofil testi, konjonktival kazıntı yaymasının Hansel boyası ile boyanıp, yaymada eozinofillerin olup olmadığının ışık mikroskobuyla değerlendirildiği bir yöntemdir. Mikroskop altında bir tek eozinofil bile saptanırsa sonuç pozitif kabul edilir ve alerjik konjonktival hastalık kesin olarak tanı konur.
Örnek alma sırasında kanama görülürse, kan hücreleri örneğe karışmış olabilir; bu nedenle değerlendirme için diğer göz yeniden test edilmelidir.
Eozinofiller ağır olgularda (VKC・AKC) daha sık saptanır ve SAC/PAC’te saptanmayabilir. Bu yöntem, kesin tanı gerektiğinde veya şiddetin objektif değerlendirilmesinde kullanılır.
7. En son araştırmalar ve geleceğe yönelik beklentiler
Section titled “7. En son araştırmalar ve geleceğe yönelik beklentiler”Gözyaşında antijen-özgül IgE ölçümü
Section titled “Gözyaşında antijen-özgül IgE ölçümü”Gözyaşında özgül IgE’yi (örneğin sedir özgül IgE) ölçen kitlerin araştırma ve geliştirme çalışmaları ilerlemektedir. Gözyaşı toplam IgE’sine ek olarak, gözdeki yerel duyarlanmayı yapan alerjen doğrudan saptanabilirse, kan almadan poliklinikte aynı gün neden olan alerjenin tanısı mümkün olacaktır. Şu anda bu çalışma araştırma aşamasındadır.
Biyobelirteçlerle şiddet değerlendirmesi
Section titled “Biyobelirteçlerle şiddet değerlendirmesi”Gözyaşı sıvısında periostin, eotaksin ve TARC (CCL17) gibi biyobelirteçlerin şiddet değerlendirmesinde kullanılma olasılığı araştırılmaktadır. Özellikle periostin, Th2 inflamasyonunun bir göstergesi olarak dikkat çekmektedir ve VKC ile AKC’de hastalık aktivitesini yansıtabileceği öne sürülmüştür4).
Alerjen immünoterapisinde antikor titresi izlemi
Section titled “Alerjen immünoterapisinde antikor titresi izlemi”Sedir poleni alerjisi için sublingual immünoterapi ve subkutan immünoterapinin etkinliğini değerlendirmek amacıyla, serumdaki spesifik IgE antikor titrelerindeki değişikliklerin izlenmesine yönelik çalışmalar ilerlemektedir5). İmmünoterapi sonrası IgE antikor titrelerinin geçici olarak yükselip sonra düştüğü bildirilmiştir ve bunun gözyaşı IgE izlemesine uygulanması da değerlendirilmektedir.
Çocuklarda alerji testi
Section titled “Çocuklarda alerji testi”Çocuklarda alerjik konjonktival hastalıkta, özellikle VKC’de, deri testlerini uygulamak zor olabilir ve gözyaşı IgE ile serum IgE yararlıdır. Çocuklarda her bir testin duyarlılığı ve özgüllüğünün büyük ölçekli değerlendirilmesine ve önerilen test prosedürleri üzerine araştırmalara ihtiyaç vardır6).
8. Kaynaklar
Section titled “8. Kaynaklar”- 日本眼科アレルギー学会診療ガイドライン作成委員会. アレルギー性結膜疾患診療ガイドライン（第3版）. 日眼会誌. 2021;125(8):741-785.
- 庄司純, 内尾英一, 海老原伸行, 大橋裕一, 大野重昭, 岡本茂樹, 他. アレルギー性結膜疾患診断における自覚症状，他覚所見および涙液総IgE検査キットの有用性の検討. 日眼会誌. 2012;116(5):485-493. http://journal.nichigan.or.jp/Disp?mag=0&number=5&start=485&style=abst&vol=116&year=2012.
- 岡本茂樹, 内尾英一, 海老原伸行, 他. 2017年度日本眼科アレルギー学会アレルギー性結膜疾患実態調査. 日眼会誌. 2022;126(7):625-635.
- Fujishima H, Okada N, Matsumoto K, Fukagawa K, Igarashi A, Matsuda A, Ono J, Ohta S, Mukai H, Yoshikawa M, Izuhara K. The usefulness of measuring tear periostin for the diagnosis and management of ocular allergic diseases. J Allergy Clin Immunol. 2016;138(2):459-467.e2. doi:10.1016/j.jaci.2015.11.039.
- 鈴木茂伸, 堀口裕正, 遠藤昌夫. スギ花粉症の舌下免疫療法とアレルゲン特異的IgE抗体価の推移. アレルギー. 2018;67(6):704-711.
- Leonardi A, Bogacka E, Fauquert JL, Kowalski ML, Groblewska A, Jedrzejczak-Czechowicz M, et al. Ocular allergy: recognizing and diagnosing hypersensitivity disorders of the ocular surface. Allergy. 2012;67(11):1327-37. doi:10.1111/all.12009. PMID:22947083.