Tes IgE total dalam air mata dan antibodi alergen (kit tes darah alergi)

Poin utama penyakit ini

• Diagnosis penyakit konjungtiva alergi dibagi menjadi tiga tahap: diagnosis klinis, diagnosis klinis pasti, dan diagnosis pasti
• Pemeriksaan IgE total air mata (Allerwatch) adalah kit diagnosis cepat yang menggunakan metode imunokromatografi dan dapat dinilai pada hari yang sama di poliklinik
• Angka positif IgE air mata pada keratokonjungtivitis vernal (VKC) tinggi, yaitu 94,7%, sedangkan pada konjungtivitis alergi musiman dan sepanjang tahun hanya 60–65%, sehingga perlu mewaspadai hasil negatif palsu
• Pemeriksaan antibodi IgE spesifik antigen dalam serum bermanfaat untuk memastikan kecenderungan alergi sistemik dan mengidentifikasi antigen penyebab, dengan cakupan asuransi hingga 13 item
• Tes kulit (tes tusuk dan tes gores) memiliki risiko anafilaksis, sehingga kontraindikasi harus dipastikan sebelum dilakukan
• Pemeriksaan eosinofil (pewarnaan Hansel) diperlukan untuk diagnosis pasti, dan ditemukannya satu eosinofil saja sudah dianggap positif
• Keempat pemeriksaan ini memiliki tujuan yang berbeda, sehingga penting untuk digunakan sesuai tingkat diagnosis

1. Apa itu IgE total air mata dan pemeriksaan antibodi alergen?

Diagnosis penyakit konjungtiva alergi dibagi menjadi tiga tahap menurut Pedoman Praktik Klinis Penyakit Konjungtiva Alergi (Edisi ke-3)¹⁾.

Tingkat diagnosis	Temuan yang diperlukan
Diagnosis klinis	Hanya temuan klinis
Diagnosis klinis pasti	Temuan klinis + kecenderungan alergi (IgE total air mata, tes kulit, IgE spesifik alergen serum)
Diagnosis pasti	Temuan klinis + reaksi alergi lokal pada mata (tes eosinofil)

Dalam artikel ini, “pemeriksaan IgE total air mata dan antibodi alergen” adalah istilah umum untuk kelompok pemeriksaan yang mendukung sistem diagnosis ini. Pemeriksaan IgE total air mata dapat dengan cepat memastikan kecenderungan alergi lokal pada mata pada hari yang sama di poliklinik, dan digunakan untuk diagnosis klinis pasti. Pemeriksaan antibodi IgE spesifik alergen dalam serum dan tes kulit digunakan untuk memastikan kecenderungan alergi sistemik serta mengidentifikasi alergen penyebab. Diagnosis pasti memerlukan pemeriksaan eosinofil dengan sediaan apus kerokan konjungtiva.

Penyakit konjungtiva alergi memiliki prevalensi yang tinggi, terutama yang berkaitan dengan demam serbuk sari cedar, dan survei tahun 2017 menemukan penyakit konjungtiva alergi pada sekitar 15–20% pasien yang berkunjung ke fasilitas oftalmologi di seluruh Jepang³⁾. Pemilihan pemeriksaan yang tepat dan pemahaman tentang sistem diagnosis mengarah pada klasifikasi yang akurat dan pengobatan yang tepat.

Q Apa yang dapat diketahui dari tes IgE air mata?

A

Keberadaan atau ketiadaan kecenderungan alergi lokal pada mata dapat dinilai pada hari yang sama di poliklinik. Alerwatch Tear IgE adalah kit diagnosis cepat yang menggunakan imunokromatografi, dan bila hasilnya positif atau agak positif, diagnosisnya adalah “ada kecenderungan alergi lokal pada mata”. Bersama temuan klinis, tes ini membantu diagnosis klinis pasti. Diagnosis pasti memerlukan tes eosinofil secara terpisah.

2. Tes IgE total air mata (Alerwatch)

Inada N, Ishimori A, Shoji J. CCL20/MIP-3 alpha mRNA expression in the conjunctival epithelium of normal individuals and patients with vernal keratoconjunctivitis. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2014;252(12):1977-1984. Figure 2. PMCID: PMC4245489. License: CC BY.

Pada kasus berat vernal keratokonjungtivitis (VKC), konjungtiva kelopak atas tampak dengan susunan seperti batu mozaik (cobblestone) akibat papila besar yang padat berdesakan. Ini sesuai dengan tingkat positif IgE air mata yang tinggi (94,7%) pada vernal keratokonjungtivitis yang dibahas dalam bagian “Pemeriksaan IgE total air mata (Allerwatch)”.

Kit pemeriksaan dan prinsip

IgE total air mata diperiksa dengan kit diagnosis cepat berbasis imunokromatografi (Allerwatch Tear IgE, Wakamoto Pharmaceutical / Minaris Medical). Pada imunokromatografi, IgE dalam air mata berikatan dengan antibodi anti-IgE manusia berlabel emas koloid pada strip, lalu ditangkap oleh antibodi terimobilisasi pada garis tes melalui aksi kapiler sehingga membentuk garis berwarna.

Prosedur pemeriksaan

1. Masukkan strip tes ke dalam sakus konjungtiva kelopak bawah untuk mengumpulkan air mata
2. Bentangkan strip tes
3. Baca garis tes dan garis kontrol secara visual lalu tentukan hasilnya

Interpretasi hasil

Hasil dinilai dalam empat tingkat: positif, positif lemah, negatif, dan tidak dapat ditentukan. Positif atau positif lemah didiagnosis sebagai “predisposisi alergi lokal pada mata”.

Tingkat positif menurut jenis penyakit

Tingkat positif IgE total air mata menurut jenis penyakit ditunjukkan di bawah ini²⁾.

Jenis penyakit	Tingkat positif (jumlah kasus positif / jumlah total kasus)
SAC (konjungtivitis alergi musiman)	61.9%（52/84）
PAC (konjungtivitis alergi perennial)	65.4%（34/52）
AKC (keratokonjungtivitis atopik)	80.5%（33/41）
VKC (keratokonjungtivitis vernal)	94.7%（36/38）
GPC (konjungtivitis papiler raksasa)	75.0%（6/8）
Total	72.2%（161/223）

Pada SAC/PAC, tingkat positif hanya 60–65%, sehingga tingkat negatif palsu mencapai sekitar 35–38%. Meski tes IgE pada air mata negatif, penting untuk menegakkan diagnosis secara menyeluruh bersama temuan klinis²⁾.

Q Apakah alergi konjungtivitis masih mungkin meski tes IgE pada air mata negatif?

A

Ya. Pada SAC (konjungtivitis alergi musiman) dan PAC (konjungtivitis alergi perenial), tingkat positif sekitar 60–65%, dan negatif palsu terjadi pada sekitar 35–38% kasus. Karena diagnosis hanya dengan tes IgE pada air mata memiliki keterbatasan, penting untuk menilai secara menyeluruh bersama temuan klinis (kemerahan pada kelopak dan konjungtiva, hipertrofi papil, rasa gatal, dll.) serta IgE spesifik antigen serum.

3. Pemeriksaan titer antibodi IgE spesifik antigen serum

Metode pemeriksaan

Dilakukan pengambilan darah, lalu antibodi IgE spesifik antigen di dalam darah diperiksa secara in vitro. Pemeriksaan ini digunakan untuk menilai kecenderungan alergi sistemik dan mengidentifikasi antigen penyebab.

Item pemeriksaan dipilih dari tungau debu, debu rumah, serbuk sari cedar, orchard grass, timothy grass, dan lain-lain yang memiliki tingkat positif tinggi pada pasien dengan penyakit konjungtiva alergi. Tanggungan asuransi berlaku hingga 13 item per pemeriksaan.

Pemeriksaan skrining

Sebagai pemeriksaan skrining yang dapat mengukur banyak item sekaligus, tersedia pemeriksaan berikut.

• View Allergy 39 (Thermo Fisher Diagnostics): dapat mengukur 39 item sekaligus. Ditanggung asuransi
• Mast Immunosystems V (Minaris Medical): dapat melakukan pengukuran beberapa item secara bersamaan. Ditanggung asuransi

Pemeriksaan ini berguna untuk skrining pada kasus kunjungan pertama ketika antigen penyebab belum dipersempit.

Interpretasi hasil

Jika ada item yang menunjukkan titer antibodi IgE spesifik antigen serum positif, maka didiagnosis memiliki kecenderungan alergi sistemik. Antibodi IgE spesifik antigen menunjukkan antigen yang telah membuat pasien tersensitisasi, tetapi antigen penyebab harus dinilai dengan mempertimbangkan titer antibodi dan gejala klinis (seperti gejala yang memburuk saat musim serbuk sari, atau kaitannya dengan lingkungan dalam ruangan).

Jika antigen yang sudah dipastikan tersensitisasi tidak sesuai dengan gejala yang sebenarnya, pertimbangkan kemungkinan sensitisasi terhadap beberapa antigen atau penurunan titer antibodi akibat sensitisasi jangka panjang.

4. Tes kulit (tes tusuk dan tes garuk)

Metode

Ada dua jenis tes kulit untuk reaksi alergi segera: tes tusuk dan tes garuk. Untuk antigen uji, pilih beberapa antigen yang dicurigai dari gejala klinis lalu lakukan pemeriksaan. Saat pemeriksaan, penting untuk melakukan kontrol positif (untuk mengecek hasil negatif palsu) dan kontrol negatif (untuk memastikan bukan urtikaria mekanik) secara bersamaan.

• Tes tusuk: teteskan larutan alergen pada kulit sisi fleksi lengan bawah, lalu masukkan antigen dengan menusuk kulit memakai jarum khusus
• Tes garuk: buat luka dangkal pada kulit dengan alat khusus, lalu oleskan larutan alergen agar meresap ke dalam kulit

Kriteria penilaian

Diameter terbesar bentol dan rata-rata antara diameter tersebut dengan diameter yang tegak lurus di titik tengahnya digunakan sebagai ukuran reaksi. Bentol dengan diameter 3 mm atau lebih, atau reaksi setidaknya setengah dari bentol kontrol positif, dinilai positif. Penilaian biasanya dilakukan setelah 15–20 menit.

Kontraindikasi dan perhatian

Hal-hal yang perlu diperhatikan sebelum melakukan tes kulit

Tes kulit dapat memicu gejala alergi selama pemeriksaan. Pada pasien yang termasuk berikut, pertimbangkan untuk melakukannya dengan hati-hati atau beralih ke pemeriksaan IgE spesifik alergen dalam serum.

• Pasien asma bronkial yang tidak terkontrol
• Pasien yang dapat mengalami anafilaksis dengan sejumlah kecil alergen
• Pasien dengan penyakit kardiovaskular berat seperti penyakit arteri koroner atau aritmia yang mengancam jiwa

Antagonis reseptor histamin H₁ (antihistamin) dan antidepresan trisiklik dapat memengaruhi hasil tes kulit. Pada pasien yang sedang menggunakan obat ini, berikan masa penghentian sebelum pemeriksaan atau alihkan ke tes IgE spesifik alergen dalam serum.

Q Apa saja hal yang perlu diperhatikan saat melakukan tes kulit?

A

Lakukan kontrol positif dan kontrol negatif secara bersamaan untuk memastikan keandalan pemeriksaan. Pada pasien dengan asma bronkial yang tidak terkontrol atau pasien dengan risiko anafilaksis, pertimbangkan dengan hati-hati apakah akan dilakukan dan pertimbangkan alih ke pemeriksaan IgE serum. Karena antihistamin dan antidepresan trisiklik memengaruhi hasil, pengecekan obat sebelum pemeriksaan sangat penting.

5. Perbandingan tiap pemeriksaan dan kapan digunakan

Perbandingan karakteristik 4 pemeriksaan

Pemeriksaan	Objek penilaian	Sensitivitas pada VKC	Cakupan asuransi	Karakteristik
IgE total air mata (Allerwatch)	Kecenderungan alergi lokal pada mata	94.7%	Ada, sederhana	Dapat ditentukan pada hari yang sama di poliklinik
IgE serum spesifik alergen	Kecenderungan alergi sistemik dan identifikasi antigen penyebab	—	Ada (hingga 13 item)	Bermanfaat untuk mengidentifikasi antigen penyebab
Tes kulit	Kecenderungan alergi sistemik	—	Ada	Risiko anafilaksis
Pemeriksaan eosinofil	Reaksi alergi lokal pada mata	—	ada	penting untuk diagnosis pasti

Alur pemeriksaan dalam praktik klinis

Berikut alur dasar pemeriksaan dalam praktik klinis¹⁾.

1. Mencurigai alergi dari temuan klinis (diagnosis klinis): periksa temuan seperti gatal, kemerahan, dan pembesaran papila
2. Mengonfirmasi kecenderungan alergi (diagnosis klinis pasti): konfirmasi dengan IgE pada air mata atau IgE spesifik alergen dalam serum. Jika ingin mengidentifikasi alergen penyebab, IgE serum bermanfaat
3. Melakukan diagnosis pasti bila perlu (diagnosis pasti): konfirmasi reaksi alergi lokal pada mata dengan pemeriksaan eosinofil

Pemeriksaan IgE air mata unggul karena dapat dinilai pada hari yang sama di poliklinik, tetapi perlu waspada terhadap hasil negatif palsu pada SAC/PAC. Jika tes kulit sulit dilakukan karena risiko anafilaksis atau alasan lain, beralih ke pemeriksaan IgE serum spesifik alergen.

6. Rincian prinsip pemeriksaan dan pemeriksaan eosinofil

IgE dan reaksi alergi segera

IgE adalah imunoglobulin utama pada reaksi alergi segera (tipe I). IgE terikat melalui reseptor IgE afinitas tinggi (FcεRI) di permukaan sel mast dan basofil yang telah tersensitisasi. Saat antigen masuk kembali, IgE mengalami ikatan silang, terjadi degranulasi, dan mediator inflamasi seperti histamin dan leukotrien dilepaskan.

Di mata, banyak sel mast terdapat di konjungtiva, dan reaksi ini menimbulkan gejala alergi seperti kemerahan, gatal, dan berair mata. Kadar total IgE dalam air mata mencerminkan derajat sensitisasi lokal pada mata.

Prinsip imunokromatografi

Prinsip metode imunokromatografi yang digunakan pada AllerWatch IgE air mata adalah sebagai berikut.

• IgE dalam air mata berikatan dengan antibodi anti-IgE manusia berlabel koloid emas pada strip
• Bergerak sepanjang strip melalui aksi kapiler
• Antibodi yang terfiksasi pada garis uji menangkap IgE, membentuk garis berwarna
• Bila IgE terdapat di atas jumlah tertentu, garis berwarna menjadi terlihat dan dinilai positif

Metode pengukuran IgE serum

Metode berikut digunakan untuk mengukur IgE spesifik antigen dalam serum.

• Metode ImmunoCAP (imunoasai enzim fluoresen): metode kuantitatif yang paling banyak digunakan. Pengukuran dengan sensitivitas tinggi dapat dilakukan dengan sampel yang sangat sedikit
• Metode MAST (metode CAP-RAST): metode deteksi menggunakan alergen yang diimobilisasi
• Nilai kuantitatif dinyatakan dalam UA/mL (atau kU/L), dan 0,35 kU/L atau lebih sering dianggap positif

Pemeriksaan eosinofil (diagnosis pasti)

Pemeriksaan eosinofil adalah metode di mana sediaan apus dari kerokan konjungtiva diwarnai dengan pewarnaan Hansel, lalu keberadaan eosinofil dalam apus dinilai dengan mikroskop cahaya. Jika bahkan satu eosinofil saja terkonfirmasi di bawah mikroskop, hasil dinyatakan positif dan penyakit konjungtiva alergi didiagnosis pasti.

Jika terlihat perdarahan saat pengambilan sampel, mungkin ada sel darah yang tercampur ke dalam sampel, sehingga mata yang lain perlu diperiksa ulang untuk penilaian.

Eosinofil lebih sering terdeteksi pada kasus berat (VKC・AKC), dan pada SAC/PAC kadang tidak terdeteksi. Metode ini digunakan saat diperlukan diagnosis pasti atau penilaian derajat keparahan secara objektif.

7. Riset terbaru dan prospek ke depan

Pernyataan penyangkalan medis

Konten berikut saat ini masih dalam tahap penelitian atau pengembangan, dan mungkin berbeda dari pemeriksaan standar yang tersedia di poliklinik mata umum. Ini adalah informasi rujukan untuk tenaga profesional mengenai perkembangan medis di masa depan.

Pengukuran IgE spesifik antigen dalam air mata

Penelitian dan pengembangan kit untuk mengukur IgE spesifik dalam air mata (misalnya IgE spesifik cedar) sedang berlangsung. Jika, selain total IgE air mata, alergen pemicu sensitisasi lokal pada mata dapat diidentifikasi langsung, diagnosis alergen penyebab pada hari yang sama di poliklinik akan dimungkinkan tanpa pengambilan darah. Saat ini masih dalam tahap penelitian.

Penilaian derajat keparahan menggunakan biomarker

Biomarker seperti periostin, eotaxin, dan TARC (CCL17) dalam air mata sedang diteliti untuk kemungkinan digunakan dalam penilaian tingkat keparahan. Khususnya, periostin menarik perhatian sebagai penanda peradangan Th2, dan diduga dapat mencerminkan aktivitas penyakit pada VKC dan AKC⁴⁾.

Pemantauan titer antibodi pada imunoterapi alergen

Penelitian sedang berkembang untuk memantau perubahan titer antibodi IgE spesifik serum guna menilai efektivitas imunoterapi sublingual dan imunoterapi subkutan untuk alergi serbuk sari cedar⁵⁾. Dilaporkan bahwa titer antibodi IgE sempat meningkat lalu menurun setelah imunoterapi, dan penerapannya untuk pemantauan IgE air mata juga sedang dipertimbangkan.

Pemeriksaan alergi pada anak

Pada penyakit konjungtiva alergi pada anak, terutama VKC, pemeriksaan kulit bisa sulit dilakukan, dan IgE air mata serta IgE serum bermanfaat. Diperlukan evaluasi berskala besar terhadap sensitivitas dan spesifisitas tiap pemeriksaan pada anak, serta penelitian tentang prosedur pemeriksaan yang direkomendasikan⁶⁾.

8. Referensi

1. 日本眼科アレルギー学会診療ガイドライン作成委員会. アレルギー性結膜疾患診療ガイドライン（第3版）. 日眼会誌. 2021;125(8):741-785.
2. 庄司純, 内尾英一, 海老原伸行, 大橋裕一, 大野重昭, 岡本茂樹, 他. アレルギー性結膜疾患診断における自覚症状，他覚所見および涙液総IgE検査キットの有用性の検討. 日眼会誌. 2012;116(5):485-493. http://journal.nichigan.or.jp/Disp?mag=0&number=5&start=485&style=abst&vol=116&year=2012.
3. 岡本茂樹, 内尾英一, 海老原伸行, 他. 2017年度日本眼科アレルギー学会アレルギー性結膜疾患実態調査. 日眼会誌. 2022;126(7):625-635.
4. Fujishima H, Okada N, Matsumoto K, Fukagawa K, Igarashi A, Matsuda A, Ono J, Ohta S, Mukai H, Yoshikawa M, Izuhara K. The usefulness of measuring tear periostin for the diagnosis and management of ocular allergic diseases. J Allergy Clin Immunol. 2016;138(2):459-467.e2. doi:10.1016/j.jaci.2015.11.039.
5. 鈴木茂伸, 堀口裕正, 遠藤昌夫. スギ花粉症の舌下免疫療法とアレルゲン特異的IgE抗体価の推移. アレルギー. 2018;67(6):704-711.
6. Leonardi A, Bogacka E, Fauquert JL, Kowalski ML, Groblewska A, Jedrzejczak-Czechowicz M, et al. Ocular allergy: recognizing and diagnosing hypersensitivity disorders of the ocular surface. Allergy. 2012;67(11):1327-37. doi:10.1111/all.12009. PMID:22947083.