Teste de IgE total nas lágrimas e anticorpos para alérgenos (kit de exame de sangue para alergia)
1. O que são a IgE total na lágrima e os testes de anticorpos contra alérgenos?
Seção intitulada “1. O que são a IgE total na lágrima e os testes de anticorpos contra alérgenos?”O diagnóstico das doenças conjuntivais alérgicas é classificado em três etapas de acordo com a Diretriz de Prática Clínica das Doenças Conjuntivais Alérgicas (3ª edição)1).
| Nível de diagnóstico | Achados necessários |
|---|---|
| Diagnóstico clínico | Apenas achados clínicos |
| Diagnóstico clínico definitivo | Achados clínicos + predisposição alérgica (IgE total na lágrima, teste cutâneo, IgE sérica específica para alérgeno) |
| Diagnóstico definitivo | Achados clínicos + reação alérgica local ocular (teste de eosinófilos) |
Neste artigo, “teste de IgE total na lágrima e de anticorpos contra alérgenos” é um termo geral para o grupo de exames que sustenta esse sistema diagnóstico. O teste de IgE total na lágrima pode confirmar rapidamente, no mesmo dia e no ambulatório, a predisposição alérgica local do olho, e é usado para diagnóstico clínico definitivo. O teste de IgE sérica específica para alérgeno e o teste cutâneo são usados para confirmar a predisposição alérgica sistêmica e identificar o alérgeno causador. O diagnóstico definitivo requer um teste de eosinófilos em esfregaço de raspado conjuntival.
A doença conjuntival alérgica tem alta prevalência, especialmente relacionada à rinoconjuntivite por pólen de cedro, e uma pesquisa de 2017 encontrou doença conjuntival alérgica em cerca de 15–20% dos pacientes atendidos em serviços oftalmológicos em todo o país3). A escolha adequada dos exames e a compreensão do sistema diagnóstico levam a uma classificação e tratamento precisos.
Permite determinar no mesmo dia, em consulta ambulatorial, se há ou não predisposição alérgica local no olho. Alerwatch Tear IgE é um kit de diagnóstico rápido que usa imunocromatografia, e, se o resultado for positivo ou fracamente positivo, o diagnóstico é “há predisposição alérgica local no olho”. Junto com os achados clínicos, ajuda no diagnóstico clínico definitivo. Para o diagnóstico definitivo, é necessário separadamente um teste de eosinófilos.
2. Teste de IgE total na lágrima (Alerwatch)
Seção intitulada “2. Teste de IgE total na lágrima (Alerwatch)”
Kit de teste e princípio
Seção intitulada “Kit de teste e princípio”A IgE total na lágrima é testada com um kit de diagnóstico rápido baseado em imunocromatografia (Allerwatch Tear IgE, Wakamoto Pharmaceutical / Minaris Medical). Na imunocromatografia, a IgE presente na lágrima se liga ao anticorpo anti-IgE humano marcado com ouro coloidal na tira, e é capturada pelo anticorpo imobilizado na linha de teste por ação capilar, formando uma linha colorida.
Procedimento do teste
Seção intitulada “Procedimento do teste”- Insira a tira de teste no saco conjuntival da pálpebra inferior para coletar a lágrima
- Abra a tira de teste
- Leia visualmente a linha de teste e a linha de controle e determine o resultado
Interpretação dos resultados
Seção intitulada “Interpretação dos resultados”Os resultados são avaliados em quatro categorias: positivo, fracamente positivo, negativo e inconclusivo. Quando o resultado é positivo ou fracamente positivo, o diagnóstico é de “predisposição alérgica local ocular”.
Taxa de positividade por tipo de doença
Seção intitulada “Taxa de positividade por tipo de doença”As taxas de positividade da IgE total na lágrima por tipo de doença são mostradas abaixo2).
| Tipo de doença | Taxa de positividade (número de casos positivos / número total de casos) |
|---|---|
| SAC (conjuntivite alérgica sazonal) | 61.9%（52/84） |
| PAC (conjuntivite alérgica perene) | 65.4%（34/52） |
| AKC (ceratoconjuntivite atópica) | 80.5%（33/41） |
| VKC (ceratoconjuntivite vernal) | 94.7%（36/38） |
| GPC (conjuntivite papilar gigante) | 75.0%（6/8） |
| Total | 72.2%（161/223） |
Em SAC/PAC, a taxa de positividade fica em apenas 60–65%, de modo que a taxa de falso-negativo chega a cerca de 35–38%. Mesmo quando o teste de IgE na lágrima é negativo, é importante fazer um diagnóstico abrangente junto com os achados clínicos2).
Sim. Em SAC (conjuntivite alérgica sazonal) e PAC (conjuntivite alérgica perene), a taxa de positividade é de cerca de 60–65%, e falsos-negativos ocorrem em cerca de 35–38% dos casos. Como o diagnóstico apenas com o teste de IgE na lágrima tem limitações, é importante avaliar de forma abrangente os achados clínicos (hiperemia das pálpebras e da conjuntiva, hipertrofia papilar, coceira etc.) e a IgE sérica específica ao antígeno.
3. Teste do título de IgE sérica específica ao antígeno
Seção intitulada “3. Teste do título de IgE sérica específica ao antígeno”Método do exame
Seção intitulada “Método do exame”É coletado sangue e os anticorpos IgE específicos ao antígeno no sangue são detectados in vitro. É usado para verificar a predisposição alérgica sistêmica e identificar o antígeno causador.
Os itens do exame são selecionados entre ácaros, poeira doméstica, pólen de cedro, capim-do-pomar, capim-timóteo e outros, que apresentam alta taxa de positividade em pacientes com doença conjuntival alérgica. A cobertura do seguro vale para até 13 itens por vez.
Exame de triagem
Seção intitulada “Exame de triagem”Como exame de triagem, estão disponíveis os seguintes testes, que permitem medir vários itens ao mesmo tempo.
- View Allergy 39 (Thermo Fisher Diagnostics): pode medir 39 itens ao mesmo tempo. Coberto pelo seguro
- Mast Immunosystems V (Minaris Medical): permite a medição simultânea de vários itens. Coberto pelo seguro
Esses exames são úteis para triagem em casos de primeira consulta nos quais o antígeno causador ainda não foi restringido.
Interpretação dos resultados
Seção intitulada “Interpretação dos resultados”Se algum item mostrar título positivo de IgE específica para antígeno no soro, isso é diagnosticado como uma tendência alérgica sistêmica. Os anticorpos IgE específicos para antígeno indicam os antígenos aos quais o paciente foi sensibilizado, mas o antígeno causador deve ser determinado considerando-se tanto o título de anticorpos quanto os sintomas clínicos (como piora dos sintomas na época de dispersão de pólen e relação com o ambiente interno).
Se o antígeno sensibilizado não corresponder aos sintomas reais, deve-se considerar a possibilidade de sensibilização a vários antígenos ou de redução do título de anticorpos por sensibilização de longa duração.
4. Testes cutâneos (teste do prick e teste de escarificação)
Seção intitulada “4. Testes cutâneos (teste do prick e teste de escarificação)”Há dois tipos de testes cutâneos para reações alérgicas imediatas: o teste do prick e o teste de escarificação. Para os antígenos de teste, selecionam-se vários antígenos suspeitos com base nos sintomas clínicos e realiza-se o exame. Na avaliação, é importante fazer ao mesmo tempo o controle positivo (para verificar falso-negativo) e o controle negativo (para confirmar que não se trata de urticária mecânica).
- Teste do prick: pinga-se a solução do alérgeno na pele da face flexora do antebraço e introduz-se o antígeno com uma agulha específica, perfurando a pele
- Teste de escarificação: faz-se um arranhão superficial na pele com um instrumento específico e aplica-se a solução do alérgeno para que penetre na pele
Critérios de avaliação
Seção intitulada “Critérios de avaliação”Usa-se como tamanho da reação o maior diâmetro da pápula e a média entre esse diâmetro e o diâmetro perpendicular no seu ponto médio. Um diâmetro de pápula de 3 mm ou mais, ou uma reação de pelo menos metade da pápula do controle positivo, é considerado positivo. A avaliação costuma ser feita após 15 a 20 minutos.
Contraindicações e precauções
Seção intitulada “Contraindicações e precauções”Os antagonistas dos receptores H₁ da histamina (anti-histamínicos) e os antidepressivos tricíclicos podem afetar os resultados do teste cutâneo. Em pacientes que usam esses medicamentos, estabeleça um período de suspensão antes do exame ou mude para um exame de IgE específica para alérgenos no soro.
Realize controles positivo e negativo ao mesmo tempo para confirmar a confiabilidade do exame. Em pacientes com asma brônquica mal controlada ou com risco de anafilaxia, avalie com cautela se o exame deve ser realizado e considere mudar para um exame de IgE sérica. Como os anti-histamínicos e os antidepressivos tricíclicos afetam os resultados, verificar a medicação antes do exame é essencial.
5. Comparação dos exames e como usar cada um
Seção intitulada “5. Comparação dos exames e como usar cada um”Comparação das características dos 4 exames
Seção intitulada “Comparação das características dos 4 exames”| Exame | Alvo da avaliação | Sensibilidade em VKC | Cobertura do seguro | Características |
|---|---|---|---|---|
| IgE total da lágrima (Allerwatch) | Predisposição alérgica local ocular | 94.7% | Sim, simples | Pode ser determinado no mesmo dia no ambulatório |
| IgE sérica específica para alérgenos | Predisposição alérgica sistêmica e identificação do antígeno causador | — | Sim (até 13 itens) | Útil para identificar o antígeno causador |
| Teste cutâneo | Predisposição alérgica sistêmica | — | Sim | Risco de anafilaxia |
| Teste de eosinófilos | Reação alérgica local ocular | — | há | essencial para o diagnóstico definitivo |
Fluxo de exames na prática clínica
Seção intitulada “Fluxo de exames na prática clínica”A seguir, mostra-se a forma básica de conduzir os exames na prática clínica1).
- Suspeitar de alergia pelos achados clínicos (diagnóstico clínico): confirmar achados como coceira, vermelhidão e proliferação papilar
- Confirmar a predisposição alérgica (diagnóstico clínico definitivo): confirmar a predisposição com IgE lacrimal ou IgE sérica específica do alérgeno. Se o objetivo for identificar o alérgeno causador, a IgE sérica é útil
- Realizar o diagnóstico definitivo quando necessário (diagnóstico definitivo): confirmar a reação alérgica local ocular com o teste de eosinófilos
O teste de IgE lacrimal é vantajoso porque permite avaliação no mesmo dia no ambulatório, mas é preciso atenção a falsos-negativos em SAC/PAC. Se o teste cutâneo for difícil de realizar por risco de anafilaxia ou outros motivos, mudar para o teste de IgE sérica específica do alérgeno.
6. Detalhes do princípio do exame e teste de eosinófilos
Seção intitulada “6. Detalhes do princípio do exame e teste de eosinófilos”IgE e a reação alérgica imediata
Seção intitulada “IgE e a reação alérgica imediata”A IgE é a imunoglobulina central na reação alérgica imediata (tipo I). Ela se liga, por meio do receptor de alta afinidade para IgE (FcεRI), à superfície de mastócitos e basófilos sensibilizados. Quando o antígeno entra novamente, a IgE faz ligação cruzada, ocorre desgranulação e são liberados mediadores inflamatórios como histamina e leucotrienos.
No olho, há muitos mastócitos na conjuntiva, e essa reação causa sintomas alérgicos como vermelhidão, coceira e lacrimejamento. O nível total de IgE na lágrima reflete o grau de sensibilização local ocular.
Princípio da imunocromatografia
Seção intitulada “Princípio da imunocromatografia”O princípio do método imunocromatográfico usado para o AllerWatch IgE lacrimal é o seguinte.
- A IgE presente na lágrima se liga ao anticorpo anti-IgE humana marcado com ouro coloidal na tira
- Ela se desloca ao longo da tira por capilaridade
- O anticorpo imobilizado na linha de teste captura a IgE e forma uma linha colorida
- Quando a IgE está presente acima de certa quantidade, a linha colorida se torna visível e o resultado é considerado positivo
Métodos de medição de IgE sérica
Seção intitulada “Métodos de medição de IgE sérica”Os métodos a seguir são usados para medir a IgE específica para antígeno no soro.
- Método ImmunoCAP (imunoensaio enzimático fluorescente): o método quantitativo mais amplamente utilizado. É possível fazer uma medição de alta sensibilidade com uma amostra muito pequena
- Método MAST (método CAP-RAST): método de detecção usando alérgeno imobilizado
- Os valores quantitativos são expressos em UA/mL (ou kU/L), e 0,35 kU/L ou mais é frequentemente considerado positivo
Exame de eosinófilos (diagnóstico definitivo)
Seção intitulada “Exame de eosinófilos (diagnóstico definitivo)”O exame de eosinófilos é um método em que um esfregaço de raspado conjuntival é corado com a coloração de Hansel e, em seguida, a presença ou ausência de eosinófilos no esfregaço é avaliada ao microscópio óptico. Se até mesmo um eosinófilo for confirmado ao microscópio, o resultado é considerado positivo e a doença conjuntival alérgica é diagnosticada de forma definitiva.
Se houver sangramento durante a coleta da amostra, pode haver contaminação por células sanguíneas, por isso o exame deve ser repetido no outro olho para avaliação.
Os eosinófilos são detectados com maior frequência em casos graves (VKC・AKC) e podem não ser detectados em SAC/PAC. É aplicado quando é necessário um diagnóstico definitivo ou uma avaliação objetiva da gravidade.
7. Pesquisas mais recentes e perspectivas futuras
Seção intitulada “7. Pesquisas mais recentes e perspectivas futuras”Medição de IgE específica de antígeno na lágrima
Seção intitulada “Medição de IgE específica de antígeno na lágrima”Estão avançando as pesquisas e o desenvolvimento de kits para medir IgE específica na lágrima (por exemplo, IgE específica para cedro). Se, além da IgE total na lágrima, o alérgeno sensibilizante local no olho puder ser identificado diretamente, será possível diagnosticar o alérgeno causador no mesmo dia no ambulatório, sem coleta de sangue. No momento, isso ainda está em fase de pesquisa.
Avaliação da gravidade por biomarcadores
Seção intitulada “Avaliação da gravidade por biomarcadores”Biomarcadores no fluido lacrimal, como periostina, eotaxina e TARC (CCL17), estão sendo estudados quanto à possibilidade de uso na avaliação da gravidade. Em especial, a periostina tem chamado atenção como um indicador de inflamação Th2, e foi sugerido que ela pode refletir a atividade da doença em VKC e AKC4).
Monitoramento do título de anticorpos na imunoterapia com alérgenos
Seção intitulada “Monitoramento do título de anticorpos na imunoterapia com alérgenos”Estudos estão avançando no monitoramento das mudanças no título de anticorpos IgE específicos no soro para avaliar a eficácia da imunoterapia sublingual e da imunoterapia subcutânea para alergia ao pólen de cedro5). Foi relatado que os títulos de anticorpos IgE aumentam temporariamente e depois diminuem após a imunoterapia, e também se estuda sua aplicação ao monitoramento de IgE nas lágrimas.
Exame de alergia em crianças
Seção intitulada “Exame de alergia em crianças”Na doença conjuntival alérgica pediátrica, especialmente VKC, a realização de testes cutâneos pode ser difícil, e a IgE nas lágrimas e a IgE sérica são úteis. São necessárias avaliações em larga escala da sensibilidade e da especificidade de cada teste em crianças, bem como pesquisas sobre os procedimentos de teste recomendados6).
8. Referências
Seção intitulada “8. Referências”- 日本眼科アレルギー学会診療ガイドライン作成委員会. アレルギー性結膜疾患診療ガイドライン（第3版）. 日眼会誌. 2021;125(8):741-785.
- 庄司純, 内尾英一, 海老原伸行, 大橋裕一, 大野重昭, 岡本茂樹, 他. アレルギー性結膜疾患診断における自覚症状，他覚所見および涙液総IgE検査キットの有用性の検討. 日眼会誌. 2012;116(5):485-493. http://journal.nichigan.or.jp/Disp?mag=0&number=5&start=485&style=abst&vol=116&year=2012.
- 岡本茂樹, 内尾英一, 海老原伸行, 他. 2017年度日本眼科アレルギー学会アレルギー性結膜疾患実態調査. 日眼会誌. 2022;126(7):625-635.
- Fujishima H, Okada N, Matsumoto K, Fukagawa K, Igarashi A, Matsuda A, Ono J, Ohta S, Mukai H, Yoshikawa M, Izuhara K. The usefulness of measuring tear periostin for the diagnosis and management of ocular allergic diseases. J Allergy Clin Immunol. 2016;138(2):459-467.e2. doi:10.1016/j.jaci.2015.11.039.
- 鈴木茂伸, 堀口裕正, 遠藤昌夫. スギ花粉症の舌下免疫療法とアレルゲン特異的IgE抗体価の推移. アレルギー. 2018;67(6):704-711.
- Leonardi A, Bogacka E, Fauquert JL, Kowalski ML, Groblewska A, Jedrzejczak-Czechowicz M, et al. Ocular allergy: recognizing and diagnosing hypersensitivity disorders of the ocular surface. Allergy. 2012;67(11):1327-37. doi:10.1111/all.12009. PMID:22947083.