ข้ามไปยังเนื้อหา
อื่น ๆ

การทดสอบการระบายน้ำตา (Fluorescein Dye Dilution Test)

การทดสอบการกำจัดน้ำตา (Fluorescein Dye Dilution Test) เป็นชื่อรวมของการตรวจทางจักษุวิทยาหลายชนิดที่ประเมินความเร็วในการระบายออก (turnover) ของน้ำตา โดยหยอดฟลูออเรสซีนลงในถุงเยื่อบุตาและวัดปริมาณ (หรือความเข้มข้น) ของฟลูออเรสซีนที่เหลืออยู่ในน้ำตาหลังจากเวลาที่กำหนด

น้ำตาถูกหลั่งจากต่อมน้ำตาและต่อมน้ำตารอง แล้วระบายออกผ่านทางเดินน้ำตา (ท่อน้ำตา-โพรงจมูก) สมดุลระหว่างการสร้างและการระบายเรียกว่า “การกำจัดน้ำตา” และเมื่อการทำงานนี้ลดลง ยาหยอดหรือสารกันเสียที่หยอดลงในถุงเยื่อบุตาจะค้างอยู่นานขึ้นและส่งผลเสียต่อผิวตา การลดลงของการกำจัดน้ำตาถูกระบุไว้อย่างชัดเจนในแนวทางการรักษาตาแห้ง1) ว่าเป็นปัจจัยเสี่ยงต้นทางของกลไกหลักในตาแห้ง (ชนิดขาดน้ำตา)

ความสำคัญทางคลินิกหลักมีดังนี้

  • การแยกชนิดของตาแห้ง (ชนิดขาดน้ำตา vs ชนิดระเหย)
  • แยกจากภาวะน้ำตาไหลจากการทำงานผิดปกติ (ไม่มีการอุดตันของท่อน้ำตา)
  • การประเมินการทำงานของต่อมน้ำตาในโรคตาแห้งรุนแรง เช่น Sjögren syndrome, GVHD และ ocular cicatricial pemphigoid
  • การประเมินเวลาคงค้างของน้ำตาเพื่อใช้เป็นหลักฐานในการเลือกยาหยอดตา (ที่มี BAK/ไม่มีสารกันเสีย)

ฟลูออเรสซีนเป็นสีย้อมเรืองแสงที่ละลายน้ำได้ในกลุ่มแซนทีน มีความยาวคลื่นกระตุ้น 494 นาโนเมตร และความยาวคลื่นการเรืองแสง 521 นาโนเมตร เนื่องจากความเข้มของการเรืองแสงในถุงเยื่อบุตาแปรผันตามความเข้มข้น จึงสามารถประเมินกึ่งเชิงปริมาณได้อย่างง่ายภายใต้ฟิลเตอร์สีน้ำเงินโคบอลต์ของกล้องจุลทรรศน์สลิตแลมป์

Q ทำไมการตรวจการกำจัดน้ำตาจึงสำคัญ?
A

การลดลงของการกำจัดน้ำตาไม่ได้หมายถึงเพียงปริมาณน้ำตาที่ลดลงเท่านั้น แต่ยังทำให้ไซโตไคน์ก่อการอักเสบและสารกันเสียสะสมบนผิวตา โดยเฉพาะ BAK: benzalkonium chloride แนวทางเวชปฏิบัติตาแห้ง1) ระบุชัดว่าการลดลงของการกำจัดน้ำตาเป็น “ปัจจัยเสี่ยงต้นทาง” ของโรคตาแห้ง และให้ข้อมูลสำคัญที่ส่งผลโดยตรงต่อการจำแนกชนิดของโรคและการเลือกการรักษา เช่น การใช้ยาหยอดตาไม่มีสารกันเสียหรือการพิจารณาใส่ปลั๊กท่อน้ำตา

การเปลี่ยนแปลงตามเวลาของความสูงของ meniscus น้ำตาชั้นล่างด้วย OCT ส่วนหน้า (ก่อนและหลังใส่คอนแทคเลนส์ชนิดนิ่ม)
Dogan L, Arslan GD. The analysis of tear meniscus parameters during daily soft contact lens wear using optical coherence tomography. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2025;263(1):171-179. Figure 1. PMCID: PMC11807020. License: CC BY 4.0.
ภาพ OCT ส่วนหน้าแสดงการเปลี่ยนแปลงความสูงของ meniscus น้ำตาชั้นล่างตั้งแต่ตอนที่ไม่ได้ใส่คอนแทคเลนส์ชนิดนิ่ม (A) ไปจนถึงทันทีหลังใส่ และหลัง 2 ชั่วโมง 5 ชั่วโมง และ 10 ชั่วโมง (B–E) ซึ่งสอดคล้องกับการวัดความสูงของ meniscus น้ำตาเชิงปริมาณด้วย OCT ที่กล่าวถึงในหัวข้อ “การสังเกต meniscus น้ำตาร่วมกัน” ของเนื้อหา

การทดสอบการหายไปของฟลูออเรสซีน (Fluorescein Dye Disappearance Test: FDDT)

หัวข้อที่มีชื่อว่า “การทดสอบการหายไปของฟลูออเรสซีน (Fluorescein Dye Disappearance Test: FDDT)”

การทดสอบการคงอยู่ของสีเป็นวิธีประเมินการกำจัดน้ำตาที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุด ไม่ต้องใช้อุปกรณ์พิเศษและสามารถทำได้ทันทีในคลินิกผู้ป่วยนอก ขั้นตอนมาตรฐานมีดังนี้

  1. หยอดฟลูออเรสซีน: ย้อมถุงเยื่อบุตาบริเวณ fornix ล่างด้วยแถบทดสอบฟลูออเรสซีน (หรือลูกบาศก์ไมโครลิตร 1–2 µL ของสารละลายฟลูออเรสซีน 1–2%)
  2. รอ: รอ 5 นาทีโดยกะพริบตาตามธรรมชาติ (เวลาประเมินมาตรฐานคือ 5 นาที และอาจประเมินเพิ่มเติมที่ 15 นาทีได้)
  3. สังเกต: สังเกตปริมาณสีย้อมที่คงเหลือภายใต้ฟิลเตอร์สีน้ำเงินโคบอลต์ของกล้องจุลทรรศน์สลิทแลมป์
  4. ให้คะแนน: บันทึกเป็นคะแนนกึ่งเชิงปริมาณระดับ 0–3

การทดสอบนี้อาศัยหลักการที่ว่า ยิ่งการระบายน้ำตาเร็ว สีย้อมก็จะหายไปเร็วขึ้น

Tear Function Index (TFI) เป็นดัชนีประเมินแบบรวมที่ผสานการทดสอบ Schirmer กับการทดสอบการหายไปของสีย้อม และยังถูกกล่าวถึงเป็นรายการประเมินการทำงานของน้ำตาในแนวทางการวินิจฉัยโรคตาแห้ง 1)

สูตรคำนวณมีดังนี้

TFI = ค่า Schirmer (5 นาที, มม.) ÷ คะแนนการคงค้างของสีย้อม (Grade 1–3)

  • TFI สูง: การสร้างน้ำตามากและการกำจัดดี
  • TFI ต่ำ: การสร้างน้ำตาลดลง การกำจัดลดลง หรือทั้งสองอย่าง

หากคะแนนการคงค้างของสีย้อมเป็น “0 (ไม่มีคงค้าง)” ตัวส่วนจะเป็น 0 ดังนั้นทางคลินิกจึงปรับเป็นค่าต่ำสุด 0.5 หรือบันทึกเชิงคุณภาพว่า “การกำจัดปกติ”

เมื่อจำเป็นต้องประเมินเชิงปริมาณอย่างแม่นยำมากขึ้น จะใช้วิธีวัดการไหลด้วยเครื่อง fluorophotometer

  1. หยอดสารละลายฟลูออเรสซีนที่ทราบความเข้มข้น
  2. วัดความเข้มข้นของฟลูออเรสซีนในน้ำตาเป็นระยะๆ
  3. คำนวณอัตราการไหลของน้ำตา (µL/นาที) จากกราฟการลดลงของความเข้มข้น

วิธีนี้สามารถประเมินเชิงปริมาณได้อย่างแม่นยำ แต่ต้องใช้อุปกรณ์เฉพาะ จึงใช้หลักๆ ในสถาบันวิจัย3).

การสังเกตความสูงของ lower tear meniscus ภายใต้การย้อมฟลูออเรสซีนด้วยกล้องจุลทรรศน์สลิตแลมป์ ทำให้ประเมินปริมาณการค้างของน้ำตาและอัตราการระบายได้พร้อมกัน เมื่อใช้ร่วมกับการวัดความสูงของ tear meniscus ด้วย anterior segment OCT (ค่าปกติ ≥ 0.2 mm) จะช่วยให้ประเมินการกวาดล้างได้อย่างเป็นกลางมากขึ้น

ด้านล่างเป็นการประเมินแบบกึ่งปริมาณจากปริมาณสีที่เหลืออยู่หลัง 5 นาที

ระดับสีที่เหลืออยู่หลัง 5 นาทีความหมายทางคลินิก
0ไม่มีการกำจัดปกติ
1น้อยมาก (ฟลูออเรสเซนซ์จาง)ก้ำกึ่ง (อาจลดลงเล็กน้อย)
2ค้างปานกลาง (ยังคงเห็นฟลูออเรสเซนซ์ชัด)การกวาดล้างของน้ำตา ลดลง
3ค้างเด่นชัด (ฟลูออเรสเซนซ์แรงคงอยู่อย่างกว้างขวาง)สงสัยภาวะรุนแรง (Sjögren syndrome, GVHD ฯลฯ)

Grade 2 ขึ้นไปใช้เป็นเกณฑ์โดยประมาณในการประเมินว่าการเคลียร์น้ำตาลดลง ส่วน Grade 1 อยู่ในระดับก้ำกึ่งและควรประเมินร่วมกับผลตรวจน้ำตาอื่น ๆ

อัตราการหมุนเวียนน้ำตาปกติอยู่ที่ประมาณ 16%/นาที (ในแต่ละนาที น้ำตาในถุงเยื่อบุตาประมาณ 16% จะถูกแทนที่ด้วยน้ำตาใหม่)2) หากอัตรานี้ลดลง สารต่าง ๆ ในถุงเยื่อบุตา (เช่น สารกันเสีย เมตาบอไลต์ ไซโตไคน์ก่อการอักเสบ เป็นต้น) จะคงค้างได้ง่ายขึ้น

ในกลุ่มอาการSjögren และภาวะการหลั่งน้ำตาลดลงอย่างมาก อัตราการหมุนเวียนอาจลดลงอย่างชัดเจน (เช่น ต่ำกว่า 5%/นาที)

Q ถ้ายังมีสีย้อมค้างอยู่ หมายความว่าอย่างไร?
A

การที่ยังมีฟลูออเรสซีนค้างอยู่ในถุงเยื่อบุตาหลัง 5 นาที แสดงว่าอัตราการระบาย/การเคลียร์น้ำตาลดลง เมื่อการเคลียร์ลดลง ยาหยอดตาและสารกันเสีย (เช่น BAK เป็นต้น) จะคงอยู่บนผิวตานานกว่าปกติ ทำให้ความเป็นพิษต่อเซลล์เยื่อบุผิวผิวตาเพิ่มขึ้น นอกจากนี้ยังเกิดสภาพแวดล้อมที่ไซโตไคน์ก่อการอักเสบ (เช่น IL-1β และ TNF-α) เข้มข้นขึ้น ทำให้เข้าสู่วงจรที่อาการตาแห้งแย่ลงได้ง่ายขึ้น โดยเฉพาะในกลุ่มอาการSjögren และ GVHD มักพบการค้างระดับ Grade 3 อย่างชัดเจน

การทดสอบการเคลียร์น้ำตาถูกนำมาใช้ในการแยกชนิดของตาแห้งดังนี้

ตาแห้งชนิดขาดน้ำตา (aqueous-deficient dry eye)

  • เนื่องจากการสร้างน้ำตาลดลง การหมุนเวียนน้ำตาจึงลดลงอย่างชัดเจน
  • ในการทดสอบการคงค้างของสีย้อม มักให้คะแนนสูงระดับ Grade 2 ถึง 3
  • ค่า Schirmer ก็ต่ำลงด้วย (5 มม. หรือน้อยกว่า) และ TFI ลดลง

ชนิดตาแห้งจากการระเหยมาก (evaporative dry eye):

  • เนื่องจากการสร้างน้ำตายังคงค่อนข้างดี การกำจัดจึงปกติหรือเพียงลดลงเล็กน้อย
  • การทดสอบการค้างของสีย้อมมักอยู่ระดับ Grade 0–1
  • BUT สั้นลง แต่ค่า Schirmer มักอยู่ในช่วงปกติ

การแยกโรคจากภาวะน้ำตาไหลจากการทำงานผิดปกติ (epiphora)

หัวข้อที่มีชื่อว่า “การแยกโรคจากภาวะน้ำตาไหลจากการทำงานผิดปกติ (epiphora)”

ในผู้ป่วยที่มีอาการหลักคือมีน้ำตาไหล การตรวจการกวาดล้างของน้ำตาช่วยแยกว่าน้ำตาไหลเกิดจากการอุดตันของทางเดินน้ำตาหรือเป็นน้ำตาไหลจากการทำงานผิดปกติ (ทางเดินน้ำตาเปิดอยู่แต่มีการหลั่งมากเกิน).

  • ถ้ามีการอุดตันของทางเดินน้ำตา: การทดสอบการค้างของสีย้อมจะพบการค้างชัดเจน (Grade 2–3)
  • ในกรณีน้ำตาไหลชนิดหลั่งมากเกิน: การค้างของสีย้อมมีน้อยหรือปกติ (Grade 0–1) และการทดสอบการค้างจะหายไปอย่างรวดเร็ว

เป็นที่ทราบกันว่าการกวาดล้างของน้ำตาจะลดลงอย่างมากในโรคต่อไปนี้

  • กลุ่มอาการSjögren (ชนิดปฐมภูมิและทุติยภูมิ): การสร้างน้ำตาลดลงอย่างมากจากการถูกทำลายของต่อมน้ำตาโดยภูมิคุ้มกันตนเอง
  • GVHD หลังการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด: การโจมตีของภูมิคุ้มกันต่อ ต่อมน้ำตา
  • เพมฟิกอยด์ชนิดเป็นแผลเป็นของตา: การเปลี่ยนแปลงของทางระบายน้ำตาและการระบายออกจากแผลเป็นที่เยื่อบุตา
  • ผลหลงเหลือของกลุ่มอาการ Stevens-Johnson: การสร้างน้ำตาลดลงจากการทำลายต่อมน้ำตาเสริม

ในผู้ป่วยที่การกำจัดน้ำตาลดลงอย่างมาก ยาหยอดตาที่มี BAK (benzalkonium chloride) จะค้างอยู่บนผิวตานานกว่าปกติ แนวทางการรักษาโรคตาแห้ง1)แนะนำให้ใช้ยาหยอดตาที่ไม่มี BAK ในโรคตาแห้งที่มีการหลั่งน้ำตาลดลงชัดเจน และการตรวจการกำจัดน้ำตาเป็นหลักฐานเชิงวัตถุสำหรับการตัดสินใจรักษานี้

แนวทางการรักษาโดยอิงจากผลการประเมินการกำจัดน้ำตา มีดังนี้

การลดลงของการกำจัดระดับเล็กน้อยถึงปานกลาง (Grade 1–2)

  • หยอดน้ำตาเทียมบ่อยๆ (เลือกสูตรที่ไม่มีสารกันเสียก่อน)
  • ยาหยอดตาไดควฟอสอลโซเดียม 3% (วันละ 6 ครั้ง): ช่วยคงเสถียรภาพของชั้นมิวซินและชั้นน้ำ1)
  • ยาหยอดตาเรบามิพิด 2% (วันละ 4 ครั้ง): กระตุ้นการสร้างมิวซิน1)

การลดลงของการกำจัดระดับรุนแรง (Grade 3)

  • การเลือกยาหยอดตาที่ไม่มี BAK เป็นสิ่งจำเป็น1)
  • การใส่ปลั๊กท่อน้ำตา: ลดการระบายน้ำตาและคงน้ำตาไว้บนผิวตา1)
  • ยาหยอดตาซัยโคลสปอริน: คาดว่าจะช่วยลดการอักเสบในต่อมน้ำตาและช่วยให้การหลั่งกลับคืน

ภาวะตาแห้งชนิดน้ำตาน้อยโดยรวม

  • ในแนวทางการรักษาภาวะตาแห้ง1) ปลั๊กท่อน้ำตาถูกจัดให้เป็นการรักษามาตรฐานสำหรับภาวะตาแห้งชนิดน้ำตาน้อย
  • ปลั๊กท่อน้ำตาชนิดซิลิโคนสามารถใส่และนำออกได้ง่าย และสามารถทำเป็นหัตถการผู้ป่วยนอกได้

6. ความสัมพันธ์ระหว่างหลักการวัดกับการตรวจอื่น

หัวข้อที่มีชื่อว่า “6. ความสัมพันธ์ระหว่างหลักการวัดกับการตรวจอื่น”

คุณสมบัติการเรืองแสงของฟลูออเรสซีนและหลักการวัด

หัวข้อที่มีชื่อว่า “คุณสมบัติการเรืองแสงของฟลูออเรสซีนและหลักการวัด”

ฟลูออเรสซีนจะเรืองแสงเมื่อถูกกระตุ้นที่ความยาวคลื่น 494 นาโนเมตร (แสงสีน้ำเงินโคบอลต์) และปล่อยแสงที่ 521 นาโนเมตร (สีเขียว) เนื่องจากปริมาณฟลูออเรสซีนในถุงเยื่อบุตาเป็นสัดส่วนกับความเข้มของการเรืองแสง จึงสามารถประเมินแบบกึ่งเชิงปริมาณได้โดยการสังเกตผ่านฟิลเตอร์สีน้ำเงินโคบอลต์ของกล้องจุลทรรศน์สลิตแลมป์

ตัวชี้วัดหลักที่เกี่ยวข้องกับการสร้างและการระบายน้ำตา:

  • อัตราการหมุนเวียนปกติ: ประมาณ 16%/นาที (ประมาณ 16% ของปริมาตรถุงเยื่อบุตาถูกแทนที่ต่อ นาที)2)
  • อัตราการไหลของน้ำตาปกติ: ประมาณ 1–2 µL/นาที (ค่าที่วัดได้ด้วย fluorophotometry)3)
  • ปริมาณน้ำตาที่ค้างอยู่ในถุงเยื่อบุตา: ประมาณ 7–9 µL (ขณะลืมตาพักเฉย)

จากตัวเลขเหล่านี้ จะเห็นได้ว่าโดยปกติยาหยอดที่หยอดเข้าไปส่วนใหญ่จะถูกระบายออกภายใน 5–10 นาที หากการกำจัดลดลง เวลาที่ใช้ในการระบายออกนี้จะนานขึ้น

ความสัมพันธ์ที่เกื้อหนุนกันของการตรวจน้ำตา

หัวข้อที่มีชื่อว่า “ความสัมพันธ์ที่เกื้อหนุนกันของการตรวจน้ำตา”

การตรวจการกำจัดน้ำตาจะให้ข้อมูลมากขึ้นเมื่อใช้ร่วมกับการตรวจน้ำตาอื่น ๆ ไม่ใช่ใช้เพียงอย่างเดียว

การทดสอบ BUT (tear film break-up time):

  • ประเมิน ‘คุณภาพ (ความคงตัว)’ ของน้ำตา
  • เกณฑ์หลักในแนวทางเวชปฏิบัติโรคตาแห้ง1) (5 วินาทีหรือน้อยกว่าถือว่าเป็นผลบวก)
  • จะสั้นลงเป็นพิเศษในชนิดที่มีการระเหยมาก

การทดสอบ Schirmer:

  • ประเมิน ‘ปริมาณการหลั่ง’ ของน้ำตา (5 mm หรือน้อยกว่าใช้เป็นเกณฑ์บ่งชี้ว่าการหลั่งลดลง)
  • สามารถคำนวณ TFI ได้โดยใช้ร่วมกับการทดสอบการเคลียร์น้ำตาเป็นตัวชี้วัดอ้างอิง1)

การวัดน้ำตาเมนิสคัสด้วย OCT ส่วนหน้า:

  • ความสูงของน้ำตาเมนิสคัสส่วนล่าง ≥ 0.2 มม. ถือเป็นเกณฑ์ปกติ
  • ไม่รุกล้ำ วัดเชิงปริมาณได้ และทำซ้ำได้สูง
  • เหมาะสำหรับการประเมินปริมาณน้ำตาอย่างเป็นรูปธรรม

การวัดออสโมลาริตีของน้ำตา:

  • ใช้ค่า 316 mOsm/L ขึ้นไปเป็นเกณฑ์บวกของภาวะตาแห้ง
  • ออสโมลาริตีที่สูงเป็นปัจจัยที่ส่งเสริมการอักเสบของผิวตา
Q การหมุนเวียนของน้ำตาคืออะไร?
A

การหมุนเวียนของน้ำตาคืออัตราที่น้ำตาในถุงเยื่อบุตาถูกแทนที่ด้วยน้ำตาใหม่ โดยปกติจะมีการผลัดเปลี่ยนที่อัตราประมาณ 16% ต่อ นาที และยาหยอด สิ่งแปลกปลอม และผลิตภัณฑ์เมตาบอลิซึมบนผิวตาจะถูกชะล้างออกอย่างต่อเนื่อง เมื่อการหมุนเวียนลดลง จะเกิด “น้ำตาคั่ง” ทำให้สารกันเสียอย่าง BAK และไซโตไคน์ก่อการอักเสบสะสมได้ง่าย การทดสอบการเคลียร์น้ำตาเป็นการตรวจทางคลินิกเพียงอย่างเดียวที่ประเมินการหมุนเวียนนี้ และมีความสำคัญเป็นพิเศษในผู้ป่วยที่สงสัยว่าการหลั่งน้ำตาลดลงอย่างชัดเจน

เนื่องจากฟลูออเรสซีนเป็นสีย้อมเรืองแสงที่ละลายน้ำได้ จึงต้องหยอดเข้าตาโดยตรง ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีการศึกษาการสังเกตการเคลื่อนไหวของน้ำตาบริเวณ meniscus แบบไม่รุกล้ำด้วย OCT ส่วนหน้า และการประเมินความเสถียรของชั้นไขมันด้วยการแทรกสอดของน้ำตา (interferometry) ในฐานะตัวชี้วัดทดแทนของการกำจัดน้ำตา วิธีเหล่านี้ทำให้ประเมินพลวัตของน้ำตาได้โดยไม่ต้องย้อมฟลูออเรสซีน จึงสามารถวัดได้ในสภาวะสรีรวิทยาที่เป็นธรรมชาติมากขึ้น

ในสถาบันวิจัย มีการวัดการกำจัดน้ำตาอย่างแม่นยำด้วยเครื่อง fluorophotometer วิธีนี้สามารถคำนวณอัตราการไหลของน้ำตา (µL/นาที) ได้แม่นยำยิ่งขึ้น และยังนำไปใช้ในการศึกษาด้านเภสัชจลนศาสตร์และการประเมินชีวปริมาณออกฤทธิ์ของยาหยอดตา 3) หากมีการย่อขนาดและลดต้นทุนต่อไป ในอนาคตอาจใช้งานในคลินิกผู้ป่วยนอกทั่วไปได้จริง

การลดลงของการกำจัดน้ำตาทำให้ความเข้มข้นของไซโตไคน์ก่อการอักเสบ (IL-1β, TNF-α, MMP-9 เป็นต้น) ภายในถุงเยื่อบุตาสูงขึ้น จากมุมมองนี้ การใช้ร่วมกับตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของน้ำตา (เช่น การตรวจ MMP-9) คาดว่าจะช่วยเพิ่มความแม่นยำในการวินิจฉัย ‘ตาแห้งอักเสบ’

  1. ドライアイ研究会診療ガイドライン作成委員会(島﨑潤, 横井則彦, 渡辺仁, 他). ドライアイ診療ガイドライン. 日本眼科学会雑誌. 2019;123(5):489-592.
  2. Mishima S, Gasset A, Klyce SD, Baum JL.. Determination of tear volume and tear flow. Invest Ophthalmol. 1966;5(3):264-276. PMID:5947945.
  3. Xu KP, Tsubota K. Correlation of tear clearance rate and fluorescein staining of the corneal and conjunctival epithelium. Br J Ophthalmol. 1995;79(12):1042-1047.

คัดลอกข้อความบทความแล้ววางในผู้ช่วย AI ที่คุณต้องการใช้