أمراض العيون الوراثية هي مجموعة من الأمراض التي تؤثر على هياكل مختلفة في العين مثل الشبكية والعصب البصري والقرنية والعدسة، ومعظمها ناتج عن طفرات جينية. الاختبار الجيني ضروري للتشخيص النهائي وتحديد نمط الوراثة وتقديم المعلومات لعائلة المريض، ودور طبيب العيون كبير.
يُجرى الاختبار الجيني للأغراض التالية:
هناك نوعان من الاختبارات: «الاختبارات السريرية» و«الاختبارات البحثية»، وتختلف في الغرض والتكلفة وموثوقية النتائج.
المبادئ التالية توجه إجراء الاختبارات الجينية.
يتم إرجاع نتائج الاختبار في ثلاثة أنواع:
| النتيجة | المعنى |
|---|---|
| إيجابي | تم الكشف عن طفرة مسببة للمرض |
| سلبي | لم يتم الكشف عن طفرة في المنطقة المستهدفة |
| VUS (متغير ذو أهمية غير مؤكدة) | الارتباط بين الطفرة والمرض غير مثبت |
يتطلب VUS تفسيرًا من قبل الخبراء ودراسة إضافية، ولا يمكن استخدامه كأساس للتشخيص بمفرده.
VUS هي نتيجة غير مؤكدة الارتباط بين الطفرة والمرض في الوقت الحالي، ولا يمكن تحديدها على أنها “إيجابية” أو “سلبية”. تتطلب تفسيرًا من مستشار وراثي متخصص أو طبيب عيون وراثي، وقد يتم إعادة تصنيفها من خلال تحديث قواعد البيانات أو إجراء فحوصات إضافية للعائلة.
فيما يلي المصطلحات الشائعة الاستخدام في طب العيون السريري.
فيما يلي ملخص لطرق الاختبارات الجينية الرئيسية.
| طريقة الاختبار | الهدف | الخصائص |
|---|---|---|
| تحليل النمط النووي للكروموسومات | عدد وبنية الكروموسومات | الكشف عن تشوهات كروموسومية واسعة النطاق |
| المصفوفة الدقيقة للكروموسومات | تغيرات عدد نسخ الحمض النووي | الكشف عن الأوعية الدموية المشيمية الجديدة بدقة عالية |
| FISH | تسلسل كروموسومي محدد | يتم تصويره بواسطة مسبار مستهدف |
| طريقة سانجر | جين واحد | موثوقية عالية؛ مناسب لتأكيد الطفرات القليلة |
| لوحة الجينات | جينات متعددة | تقييم شامل للجينات ذات الصلة |
| WES | الإكسوم الكامل | تحليل شامل للحالات غير المشخصة |
| تسلسل الجينوم الكامل (WGS) | الجينوم الكامل | الفحص الأكثر شمولاً بما في ذلك الإنترونات والمناطق التنظيمية |
| تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) | تسلسل قصير من DNA/RNA | تضخيم وتأكيد طفرات محددة |
في تشخيص أمراض العيون الوراثية، يُوصى بإجراء الفحوصات بشكل تدريجي بالترتيب التالي: 1)
إذا لم يتم التوصل إلى تشخيص من خلال النهج التدريجي (اللوحة → WES → WGS)، يتم النظر في الأساليب التكميلية مثل تسلسل الحمض النووي الريبوزي (RNA-seq)، والتسلسل طويل القراءة، والفحوصات الوظيفية. 1)
يمكن أن يؤدي إعادة التحليل الدوري لبيانات الإكسوم والجينوم إلى اكتشاف طفرات مسببة جديدة لم يتم تحديدها في التحليل الأولي، مما يحسن معدل التشخيص بنسبة تصل إلى 20% وفقًا للتقارير. 1)
يستهدف تسلسل الإكسوم الكامل (WES) منطقة الإكسوم المشفرة للبروتين (حوالي 1-2% من الجينوم الكامل) وتكلفته منخفضة نسبيًا. يحلل تسلسل الجينوم الكامل (WGS) الجينوم بأكمله بما في ذلك الإنترونات والمحفزات والمناطق التنظيمية، مما يمكنه من اكتشاف الطفرات في المناطق غير المشفرة، لكن التكلفة وحجم البيانات كبيران.
بشكل عام، يُوصى باتباع نهج تدريجي: اختبار اللوحة الجينية → WES → WGS. 1) أولاً، يتم تقييم الجينات المرتبطة بمجموعة الأمراض المشتبه بها باستخدام اختبار اللوحة الجينية، وفي حالة عدم الوصول إلى تشخيص، يتم الانتقال إلى WES. إذا ظل التشخيص صعبًا، يُنظر في إجراء WGS.
تُستخدم قواعد البيانات التالية لتحديد الأهمية السريرية للطفرات. 1)
معتمد
voretigene neparvovec (Luxturna): هو أول دواء للعلاج الجيني للعيون معتمد من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) والوكالة الأوروبية للأدوية (EMA) في عام 2017 لعلاج الحثل الشبكي الوراثي (LCA2) الناجم عن طفرات جين RPE65.1) يُعطى عن طريق الحقن تحت الشبكية باستخدام ناقل AAV.
التأثير في مجموعة الأطفال: في العلاج الجيني بـ AAV (المرحلة الثالثة) لمرض الكورويديرميا (طفرات جين CHM)، تم الإبلاغ عن استقرار الرؤية في مجموعة الأطفال.1)
مرحلة البحث والتجارب السريرية
مرض ستارغاردت (طفرة ABCA4): العلاج باستخدام ناقلات AAV المزدوجة والأليغنوكليوتيدات المضادة للاتجاه (ASO) قيد التقدم في المرحلة I/II. 1)
عمى الألوان الكامل (طفرة CNGA3/CNGB3): العلاج الجيني باستخدام ناقلات AUV قيد التقييم في المرحلة I/II. 1)
متلازمة آشر 1B (طفرة MYO7A): العلاج بناقلات AAV المزدوجة للجينات الكبيرة قيد التقدم في المرحلة I/II. 1)
انفصال الشبكية المرتبط بـ X (طفرة RS1): العلاج باستخدام ناقل AAV8 قيد التقييم في المرحلة I/II. 1)
في علاج الجينات في مجال طب العيون، يُعد الناقل الفيروسي المرتبط بالغدة (AAV) أكثر أنظمة التوصيل استخدامًا. 1) العين هي موقع ذو مناعة مميزة، ويمكن إعطاء العلاج موضعيًا بأقل تدخل جراحي، مما يجعلها عضوًا مستهدفًا رئيسيًا للعلاج الجيني.
تمت الموافقة على عقار voretigene neparvovec لعلاج LCA2 (العمى الليلي الخلقي الناتج عن طفرة RPE65) من قبل FDA وEMA في عام 2017، وهو متاح للاستخدام السريري. 1) العلاجات الجينية لأمراض الشبكية الوراثية الأخرى (مثل مرض ستارغارد، وعمى الألوان الكلي، ومتلازمة آشر) لا تزال في المراحل من الأولى إلى الثالثة.
